בסיס סויה Tripticaseína בסיס, הכנה ושימושים

ה סויה מרק tripticaseína זהו בינוני תרבות נוזלי, מזין מאוד ולא סלקטיבי. בשל הרבגוניות הגדולה שלה, הוא אחד התקשורת הנפוצה ביותר בתרבות נוזלית במעבדה מיקרוביולוגיה.

זה ידוע גם מרק סויה tripticasa או מעוכל קזאין סויה, אשר קיצור הוא TSB עבור ראשי התיבות שלה באנגלית אני טריפטי או CST עבור ראשי תיבות בספרדית. השימושים שלה מגוונים מאוד בגלל הרכב שלה. הוא מורכב טריפטין, סויה פפטון, נתרן כלורי, dipotassium פוספט גלוקוז.

היא מסוגלת לייצר חיידקים פתוגניים חשובים מבחינה קלינית, כולל אלה הדורשים תזונת תזונתית וחיידקים אנאירוביים. כמה פטריות אופורטוניסטיות זיהום יכול גם לפתח בסביבה זו.

בשל כוחו התזונתי הגבוה יש לו רגישות גבוהה לאיתור זיהום מיקרוביאלי, ולכן נבחר על ידי משרד החקלאות של משרד החקלאות האמריקאי לבדיקות מיקרוביולוגיות של חיסונים..

כמו כן, מרק סויה טריפטיקאז עונה על הדרישות של pharmacopoeias שונים (EP האירופי, יפנית JP ו צפון אמריקה USP) עבור המחקר המיקרוביולוגי של מוצרים ברמה תעשייתית, כגון קוסמטיקה ומזון.

מצד שני, ראוי להזכיר כי למרות השירות הגדול שלה בינוני זה זול יחסית, ולכן הוא זול עבור רוב המעבדות מיקרוביולוגיה. זה גם קל מאוד להתכונן.

אינדקס

• 1 קרן
• 2 הכנה
  • 2.1 סויה טריפטיקמין
  • 2.2 - מגוון של מרק סויה טריפטיקאזין
• 3 השתמש
• 4 זרע
• 5 בקרת איכות
• 6 מגבלות
• 7 הפניות

קרן

Trypticase, peptone וגלוקוז לספק לך את המאפיינים התזונתיים החיוניים להפוך אותו סביבה אידיאלית עבור התפתחותם של חיידקים מהירה.

בערך 6 עד 8 שעות של הדגירה כבר ניתן לראות צמיחה ברוב המיקרואורגניזמים. עם זאת, ישנם זנים לאט לאט שיכולים להימשך ימים לגדול.

נתרן כלורי ו dipotassium פוספט לשמש שיווי משקל אוסמוטי ו הרגולטור pH, בהתאמה. נוכחות הצמיחה מתבטאת בהופעת העכירות במדיום; אם אין צמיחה המדיום נשאר שקוף.

בשל צבע האור שלה ניתן לצפות בייצור של פיגמנטים, כמו זה שמוצג בתמונה ממוקם בתחילת המאמר, אשר מתאים פיגמנט המיוצר על ידי Pseudomonas aeruginosa. 

הכנה

-מרק סויה טריפטי

כדי להכין את מרק סויה Tripticase, שוקלים 30 גרם של המדיום מסחרי מיובש בקנה מידה דיגיטלי. ואז הוא מתמוסס בליטר של מים מזוקקים הכלולים בפיולה.

תערובת מותר לעמוד במשך 5 דקות ולאחר מכן הביא מקור חום לסייע בפירוק של המדיום. זה צריך להיות מזועזע לעתים קרובות תוך רותחים במשך 1 דקות.

לאחר מומס הוא מופץ צינורות בגודל המתאים לפי הצורך. צינורות עם תקע כותנה או בקליט באקליט ניתן להשתמש. לאחר מכן, צינורות הם מעוקרים עם המדיום החיטוי על 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות.

ה- pH של המדיום צריך להיות 7.3 ± 0.2

יש לקחת בחשבון כי צבע של המדיום תרבות מיובש הוא בז 'בהיר יש לאחסן ב 10 עד 35 מעלות צלזיוס, במקום יבש. בעוד המרק שהוכן הוא ענבר בהיר ויש לאחסן במקרר (2 עד 8 מעלות צלזיוס).

-וריאציות של מרק סויה tripticasein

Trypticamine שונה מרק סויה יכול להיות מוכן על ידי הוספת מלחי מרה novobiocin על מנת להפוך אותו סלקטיבי לבידוד של E. coli. אפשרות נוספת לאותה מטרה היא להכין מרק סויה tripticase בתוספת vancomycin, cefixime ו tellurite (2.5 מיקרוגרם / מ"ל).

מצד שני, יותר גלוקוז (0.25%) ניתן להוסיף מרק סויה trypticasein כאשר המטרה היא לעורר היווצרות biofilm.

השתמש

זה מזין מספיק כדי לאפשר את הצמיחה של חיידקים תובעניים או מעצבנים כגון סטרפטוקוקוס דלקת ריאות, סטרפטוקוקוס sp ו- Brucella sp, אין צורך להשלים עם דם או בסרום.

כמו כן, כמה פטריות יכול להתפתח במרק זה, כגון קנדידה אלביקנס מורכבת, Aspergillus sp ה Histoplasma capsulatum.

בנוסף, מדיום זה בתנאים אנאירוביים אידיאלי להחלמה חיידקים השייכים לסוג Clostridium, כמו גם חיידקים אנאירוביים שאינם ספורטיביים בעלי חשיבות קלינית..

אם הוסיף 6.5% נתרן כלורי יכול לשמש לצמיחה של Enterococcus ועוד סטרפטוקוקוס קבוצה D.

ברמת המחקר, זה היה מאוד שימושי בפרוטוקולים שונים, במיוחד במחקר של חיידקים טופס biofilms או biofilms. זה משמש גם כדי להכין את ההשעיה חיידקי ב 0.5% של Mac פרלנד צורך לבצע את האנטיביוגרפיה על ידי השיטה של ​​קירבי ו באואר.

במקרה זה הם לוקחים 3 עד 5 מושבות של מראה דומה לתחליב במרק סויה 4.5 מיליליטר tryptone. זה מודגרות אז עבור 2 עד 6 שעות ב 35-37 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן מותאם לריכוז הרצוי באמצעות מלוחים סטרילית. טריפטיקאז סויה מרקים לא אמור לשמש במשך 18-24 שעות של הדגירה.

נזרע

המדגם ניתן נזרע ישירות או מושבות טהור תת תרבותיים נלקח מתוך מדיה סלקטיבית. את inoculum צריך להיות קטן כדי לא לענן את המדיום לפני הדגירה.

בדרך כלל דגירה על 37 מעלות צלזיוס ב Aerobiosis במשך 24 שעות, אבל תנאים אלה יכולים להשתנות בהתאם מיקרואורגניזם כי הוא ביקש. זה יכול להיות מודגרות בתנאים אנאירובית ב 37 מעלות צלזיוס במשך כמה ימים במידת הצורך. לדוגמה, ב מיקרואורגניזמים תובעניים או איטי גדל יכול להיות מודגרות עד 7 ימים.

בניתוח המיקרוביולוגי של חומרים פרמצבטיים - כמו חיסונים - הפרוטוקולים מחמירים יותר. במקרים אלה, מרק ללא צמיחה לא נמחק עד שהוא מגיע 14 ימים של הדגירה מתמשך.

בקרת איכות

עבור כל אצווה מוכן, 1 או 2 צינורות צריך להיות מודגרות ללא חיסון להפגין סטריליות. זה חייב להישאר ללא שינוי.

ניתן גם לשתול זנים ידועים כדי להעריך את התנהגותם. בין הזנים שניתן להשתמש בהם הם:

אספרגילוס ברסילינזיס ATCC 1604, קנדידה אלביקנים אטק 10231, באסילוס תת ATCC 6633, סטפילוקוקוס אאורוס ATCC 6538 או 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  סטרפטוקוקוס פיוגנים ATCC 19615, סטרפטוקוקוס דלקת ריאות ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, סלמונלה טיפימוריום ATCC 14028.

בכל המקרים הצמיחה צריכה להיות משביעת רצון בתנאי האווירה והטמפרטורה המתאימים לכל מיקרואורגניזם.

מגבלות

-התסיסה של גלוקוז גורם לירידה של ה- pH של המדיום על ידי ייצור של חומצות. זה עשוי להיות שלילי עבור הישרדותם של כמה מיקרואורגניזמים רגישים לחומציות.

-זה לא מומלץ לשמירה על זנים, כי בנוסף לחומציות, החיידקים לאחר כמה ימים לרוקן את החומרים המזינים עם הצטברות כתוצאה של חומרים רעילים שהופכים את הסביבה inhospitable.

-יש להקפיד על טיפול בכל פרוטוקולי סטריליות, שכן המרקים מזוהמים בקלות.

-לאחר הכנת מרקים סויה tripticasein לא מנסים להעביר מרק צינור סטרילי אחר, כי זה סוג של תמרונים הוא פגיע מאוד זיהום.

הפניות

1. Cona E. תנאים למחקר רגישות טובה על ידי בדיקת דיפוזיה אגר. L מפעל אינפקטול 2002; 19 (2): 77-81. זמין ב: scielo.org
2. המעבדה הבריטית מרק סויה טרייטין. 2015. זמין ב: britanialab.com
3. מעבדת MCD. מרק סויה טריטיקה. זמין ב: Electronic-systems.com
4. מעבדה Neogen. סויה טריפטיק. זמין ב: foodsafety.neogen.com
5. פורבס ב ', סחם ד', וייסנפלד א. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי & סקוט. 12 ed. עריכה Panamericana S.A. ארגנטינה.
6. Rojas T, Vásquez Y, Reyes D, Martínez C, מדינה L. הערכת הטכניקה של immunoseparation מגנטי להתאוששות של Escherichia coli O157: H7 בקרם חלב. אלן. Expense 56 (3): 257-264. זמין ב: scielo.org.ve
7. גיל M, מרן K, Quevedo G, Sánchez A, Nicita G, Rojas T, Sánchez J, Finol מ Biofilm היווצרות מבודד סטפילוקוקוס אאורוס על פי רגישות מיקרוביאלית ומוצרים קליניים. קורות חיים 2015; 62 (1): 1-8. זמין ב: saber.ucv.ve
8. Narváez-Bravo C, Carruyo-Núñez G, Moreno M, Rodas-González A, Hoet A, Wittum T. בידוד של Escherichia coli O157: H7 בדגמי צואה של בקר רב-תכליתי של עיריית מירנדה, מדינת זוליה, ונצואלה. Rev. (Maracaibo), 2007; 17 (3): 239-245. זמין ב: scielo.org