סלניט מרק, הכנה ושימושים

ה מרק סלניט זהו מדיום סלקטיבי של תרבות נוזלית. הוא תוכנן על ידי Leifson להעשרת דגימות שבו חשד של חיידקים enteropathogenic של סוג סלמונלה נחשד..

מדיום זה עונה על הדרישות של האגודה האמריקאית לבריאות הציבור (APHA), ולכן מתקבל לחקירת נוכחות סלמונלה בדגימות צואה, שתן, מזון נוזלי או מוצק, מים, בין היתר..

ההרכב הכימי שיש לו מעדיף את ההתאוששות של מיקרואורגניזמים אלה בתורו מעכב את הצמיחה של אחרים. זה בעיקר רעיל ביותר חיידקים השייכים למשפחה Enterobacteriaceae. עם זאת, זה גם מאפשר התאוששות של זנים של Shigella ואינו מעכב את הצמיחה של Pseudomonas ו Proteus..

הוא מורכב סלניום מימן נתרן נטול מים, פוספט נתרן נטול מים, פפטונים לקטוז. יש גם וריאנט אשר ציסטין הוא הוסיף, ומכאן שמו selenite-cystine מרק.

כיום השימוש מרק ציסטין סלניט עדיף, שכן שווה התאוששות אחוז גבוה לזה שנצפה עם תקשורת סלקטיבית אחרת לאותה המטרה סלמונלה, כגון מרק נתרן tetrathionate מתקבל.

אינדקס

• 1 קרן
• 2 הכנה
  • 2.1 - סלינה
  • 2.2 - הכנת המדיום המסחרי
  • 2.3 משתנה סלציט - ציסטין
• 3 שימושים
• 4 זרע
• 5 בקרת איכות
• 6 מגבלות
• 7 הפניות

קרן

פפטונים הכלולים במרק משמשים כמרכיבים תזונתיים להתפתחות נכונה של מיקרואורגניזמים. זנים סלמונלה להשתמש peptones כמקור של חנקן, ויטמינים וחומצות אמינו.

לקטוז הוא הפחמימה להתססה, ואילו סלניט נתרן הוא המעכב המאט את צמיחת חיידקים גראם-חיוביים ביותר החיידקים הנמצאים פלורת המעיים, במיוחד של המשפחה Enterobacteriaceae. סודיום פוספט הוא חיץ המייצב את ה- pH של המדיום.

במקרה של וריאנט מרק סלניט המכיל L- ציסטין, תרכובת נוספת זו היא סוכן הפחתת ממזער את הרעילות של סלניט, להגדיל את ההתאוששות של סלמונלה.

הכנה

-מרק סלניטי

אם יש לך את הרכיבים של תערובת אתה יכול לשקול:

4 גרם של מימן נתרן selenite נתרן.

10 גרם של פוספט נתרן נטול מים.

5 גרם של פפטונים.

4 גרם של לקטוז.

ממיסים את התרכובות ב 1 ליטר מים מזוקקים סטריליים. זה יכול להיות מחומם מעט להתמוסס בשלמותו.

כמה מעבדות לחשוף את המדיום במשך 10 דקות באדיקות שוטפת כדי לעקר אותו, שכן החיטוי לא אמור לשמש. אם המדיום הוא מעוקר, זה יכול להיות מאוחסן במקרר עד שהוא משמש.

זה יכול גם להיות מוכן ללא סטרילינג ומשרתים ישירות 10 עד 15 מ"ל כדי מבחנות סטריליות.

במקרה זה, יש להשאיר אותו למנוחה ולהשתמש בו מיד. מכיוון שהמדיום אינו סטרילי, הוא אינו יכול להיות מאוחסן במקרר לשימוש מאוחר יותר.

-הכנת המדיום המסחרי

אם המדיום המסחרי זמין, 23 גרם של המדיום המיובש נשקלים ומומסרים בליטר אחד של מים מזוקקים סטריליים. חם לרגע כדי לסיים את המסה. אין לעקר ב החיטוי. מגישים aseptically 10 או 15 מ"ל של מבחנות סטריליות.

ה- pH הסופי של המדיום צריך להיות 7.0 ± 0.2.

יצוין כי צבע של המדיום מיובש הוא בז 'והכנה ברורה ענבר שקוף.

Velant selenite-cystine מרק

הוא מכיל את אותם תרכובות של מרק selenite, אבל 10 מ"ג של ציסטין מתווספים. שאר הנוהל הוא בדיוק כפי שתואר לעיל.

שימושים

מדיום זה מיוחד לשימוש במחקרים אפידמיולוגיים, במקרים בהם המחלה אינה בשלב החריף שלה, חולים אסימפטומטיים או נשאים בריאים.

הבידוד של סוג סלמונלה הוא בדרך כלל קשה, שכן הם נמצאים בדרך כלל כדי לזהם את הדגימות בצורה נדירה. להיות בכמויות קטנות הוא חפיפה בקלות על ידי צמיחה של סוגים אחרים של חיידקים הנמצאים בכמות גדולה יותר.

מאידך גיסא, חומר הגלם שבו מעובדים מזון מעובד נחשף לעיתים קרובות לחום, לתהליכי התייבשות, לשימוש בחומרי חיטוי, קרינה וחומרים משמרים, בין היתר..

לפיכך, נוכחות סלמונלה בחומר הגלם מתעללת על ידי הגשת המוצר לתהליכים התעשייתיים הנ ל ". כמו כן, במקרה של דגימות קליניות כגון צואה, הזנים עשויים להיות חלשים אם הם באים מחולים שטופלו באנטיביוטיקה..

לכן, כל מדגם שבו הנוכחות של סלמונלה חשודה כלא מראש מועשרת במרק לקטוז, ולאחר מכן מועשר ב סלניט לייעל התאוששות סלקטיבית, כגון תקשורת SS אגר אגר קסילוז, deoxycholate ליזין (XLD ), אקטיק hektoen אגר (הוא) ו אגר ירוק בהיר, בין היתר.

נזרע

עבור דגימות צואה לקחת 1 גרם של מדגם להשעות בצינור עם 10 עד 15 מ"ל של מרק selenite. אם הצואה היא נוזל לקחת 1 מ"ל ו להשעות במרק. עבור מטליות רקטלים, פריקה חומר ספוג לתוך המרק.

בדגימות של מזון מוצק לקחת 1 גרם להשעות את המרק selenite.

ב מזון נוזלי לערבב בחלקים שווים עם מרק selenite בריכוז כפול.

עבור דגימות שתן צנטריפוגה, להשליך supernatant, לקחת את כל המשקעים ולהשעות אותו במרק סלניט.

המרקים מודגרת על 37 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות של הדגירה. גידול בקטריאלי מתבטא בעכירות. צינור נוסף לכל מדגם יכול להיכלל גם לדגור על 42 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, לזרוע מדיה מוצק סלקטיבי מן המרק selenite.

בקרת איכות

כדי לשלוט על סטריליות, מרק selenite מכל אצווה ללא חיסון מודגרת על 37 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות. צפוי כי אין עכירות, או שינוי צבע של המדיום.

על מנת לשלוט על תפקוד טוב של המדיום, זנים ידועים ניתן להשתמש, כגון:

סלמונלה אנטריטידיס ATCC 13076, סלמונלה טיפימוריום ATCC 14028,  סלמונלה ATC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 ו פרוטאוס מיראביליס ATCC 43071.

התוצאות הצפויות הן:

• עבור שלושת הזנים החיידקים הראשונים הצמיחה צריכה להיות משביעת רצון.
• כדי Escherichia coli עיכוב חלקי.
• עבור פרוטאוס צמיחה מתונה.

מגבלות

מרק סלניט בינוני הוא רעיל לעור האדם, ולכן יש להימנע ממגע ישיר.

הפניות

1. פלורס-Abuxapqui J, Puc-פרנקו M, ארדיה-Navarrete M, Living-רוזל M, פרנקו-Monsreal ג'יי השוואת התקשורת והתרבות נתרן סלניט ונתרן tetrathionate, וטופחו על שניהם 37 ° C ו- 42 ° C עבור בידוד סלמונלה שרפרף של שרפרפים. Rev Biomed 2003; 14 (4): 215-220
2. מעבדות בריטניה. סלניטו קאלדו. 2015. זמין ב: britanialab.com
3. מעבדות Neogen מרק סלניטו זמין ב: foodsafety.neogen.com
4. González-Pedraza J, Pereira -Sandandres N, Soto-Valela Z, Hernández-Aguirre E, ויאריאל-קמאצ'ו ג. בידוד מיקרוביולוגי של סלמונלה. וכלים מולקולריים לגילויו. בריאות, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. זמין מ: http://www.scielo.org.
5. פורבס ב ', סחם ד', וייסנפלד א. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי & סקוט. 12 ed. עריכה Panamericana S.A. ארגנטינה.