קרן פוגל-ג'ונסון אגר, הכנה ושימושים

ה אגר פוגל-ג'ונסון הוא בינוני, סלקטיבי בינוני דיפרנציאלי תרבות, ניסח במיוחד לבידוד של סטפילוקוקוס אאורוס. מדיום זה נוצר על ידי פוגל וג 'ונסון בשנת 1960 מן השינוי של אגר tellurite גליצין נוסח בשנת 1955 על ידי זבוביץ, אוונס ניבן.

השינוי כלל הגדלת הריכוז של נוזל מניטול במדיום ועל שילוב של מחוון pH. הנוסחה הנוכחית מורכבת טריפטין, שמרים לחלץ, מניטול, dipotassium פוספט, כלוריום ליתיום, גליצין, פנול אדום, אגר, אשלגן 1% פתרון tellurite ומים.

יש לציין כי ישנם אמצעים אחרים, כמו אגר פוגל ג 'ונסון, הם סלקטיביים לבידוד של ס 'אאורוס, כגון אגר mannitol מלוחים ו אגר באירד פרקר. במובן זה, ניתן לומר כי הבסיס של אגר פוגל ג 'ונסון הוא תערובת בין אגר מאניטול מלוח אגר באירד פרקר..

במושבות הראשונות של ס 'אאורוס הם נבדלים על ידי התסיסה mannitol והפיכת מחוון pH צהוב. מאידך גיסא, בשני ס 'אאורוס הוא מאופיין על ידי צמצום tellurite כדי Tellurium ויצירת מושבות אפור שחור. שני המאפיינים נצפו אגר Vogel-Johnson.

מדיום זה, כמו עמיתיו, הוא שימושי עבור איתור סטפילוקוקוס אאורוס בדגימות מזון, בקרות סניטריות של מוצרים תעשייתיים ובדגימות קליניות.

אינדקס

• 1 קרן
  • 1.1 תרומת חומרי הזנה
  • 1.2 הספק סלקטיבי
  • 1.3 כוח דיפרנציאלי
  • 1.4 איזון אוסמוטי וסוכן מחזק
• 2 הכנה
  • 2.1% 1% w / V אשלגן Tellurite פתרון
  • 2.2 בינוני בסיס אגר Vogel-Johnson
• 3 השתמש
• 4 בקרת איכות
• 5 הפניות

קרן

תרומת חומרי הזנה

מדיום פוגל ג 'ונסון מכיל טריפטין תמצית שמרים; שני החומרים מספקים חומצות אמינו ארוכות שרשרת המשמשות מקורות פחמן וחנקן הדרושים לצמיחה חיידקית. חיידקים המסוגלים לגדול במדיום זה ייקח את החומרים המזינים מחומרים אלה.

כוח סלקטיבי

פוגל ג 'ונסון אגר הוא מסוגל לעכב את הצמיחה של חיידקים גראם שלילי ואפילו כמה חיידקים חיוביים גרם, לטובת פיתוח staghylococci חיובי coagulase. החומרים המעכבים הם טלוריט אשלגן, ליתיום כלורי וגליצין.

כוח דיפרנציאלי

החומרים שהופכים את המדיום הדיפרנציאלי הזה הם mannitol ו tellurite אשלגן. מניטול הוא פחמימות, וכאשר הוא מותסס, חומצות מיוצרות שהופכות את המדיום מאדום לצהוב, מה שקורה הודות לנוכחות מחוון pH אדום pH.

בעוד, tellurite חסר צבע כאשר מופחת ל telluride חינם מתכתי, לוקח אפור כהה לצבע שחור.

ה סטפילוקוקוס אאורוס תסיסה mannitol ומפחית tellurite כדי Tellurium. זו הסיבה המושבות טיפוסי של ס 'אאורוס במדיום זה הם אפורים או שחורים מוקפים במדיום צהוב.

חיידקים שגדלים במדיום זה ואינם מורידים את הטלוריט או המניטול, יקימו מושבות שקופות מוקפות במדיום אדום, אפילו יותר אינטנסיבי מהצבע המקורי, בשל אלקליניזציה של המדיום על ידי שימוש בפפטונים..

מצד שני, חיידקים המפחיתים tellurite אבל לא תסיסה mannitol יגדל כמו מושבות אפורות או שחורות מוקף צבע אדום עמוק.

אם המדיום הוכנו ללא תוספת של tellurite אשלגן, המושבות של ס 'אאורוס הם היו מתפתחים כמושבות צהובות, מוקפות במדיום צהוב, כמו אגר מאניטול מלוח.

איזון אוסמוטי וסוכן מחזק

Dipotassium פוספט שומרת על האיזון האוסמוטי של המדיום ומתאים את ה- pH לנייטרליות 7.2. בעוד אגר נותן עקביות מוצקה למדיום התרבות.

הכנה

1% אשלגן tellurite פתרון w / v

פתרון זה אינו נכלל במדיום מיובש, כי זה לא ניתן לעקר ב החיטוי. מסיבה זו הוא מוכן בנפרד והוסיף המדיום מעוקרים.

כמה בתים מסחריים למכור מוכן לשימוש 1% אשלגן tellurite פתרון. אם אתה רוצה להתכונן במעבדה, פעל כדלקמן:

לשקול 1.0 גרם של Tellurite אשלגן ולמדוד 100 מ"ל של מים מזוקקים. ממיסים את tellurite של אשלגן בחלק של מים ולאחר מכן להשלים את כמות המים עד שתגיע 100 מ"ל. לעקר את הפתרון על ידי שיטת סינון.

Vogel-Johnson בינוני בסיס אגר

לשקול 60 גרם של המדיום מיובש, להתמוסס 1 ליטר מים מזוקקים. תערובת מחומם רותח כדי לסייע בפירוק מוחלט. במהלך תהליך הפירוק המדיום הוא נסער לעתים קרובות.

לעקר החיטוי על 15 £ של לחץ ו 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות. הסר מן החיטוי ולאפשר לעמוד עד המדיום מגיע לטמפרטורה של כ 45 עד 50 מעלות צלזיוס. הוסף 20 מ"ל של אשלגן מוכן בעבר פתרון tellurite ל 1%.

מערבבים ויוצקים לתוך צלחות פטרי סטריליות. אפשר לחזק ולהזמין הפוך בלוחות לאחסון מאוחר יותר במקרר עד לשימוש.

ה- pH הסופי של המדיום מוכן צריך להיות 7.2 ± 0.2.

לפני שתילת מדגם, לחכות עד צלחת לוקח את הטמפרטורה הסביבה.

צבע המדיום מוכן הוא אדום.

השתמש

למרות שזה יכול לשמש לבידוד של ס 'אאורוס בכל סוג של דגימות, הוא משמש בעיקר לניתוח מיקרוביולוגי של מוצרים פרמצבטיים, קוסמטיקה ומזון.

מומלץ כי את inoculum להיות צפוף. הזריעה יכולה להתבצע על ידי הפשטה עם הידית פלטינה או על ידי השטח עם מרית Drigalski.

הצלחות מודגרת על 35-37 מעלות צלזיוס למשך 24 עד 48 שעות ב Aerobiosis.

בקרת איכות

כדי לבצע את בקרת האיכות של המדיום של Vogel-Johnson, ניתן להשתמש בזני הבקרה הבאים:

סטפילוקוקוס אאורוס ATCC 25923, סטפילוקוקוס אאורוס ATCC 6538, סטפילוקוקוס אפידרמידיס ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 או פרוטאוס מיראביליס ATCC 43071.

התוצאה הצפויה היא כדלקמן: עבור זנים של ס 'אאורוס צמיחה משביעת רצון עם מושבות שחורות מוקפות במדיום צהוב. כדי ס האפידרמיס גידול קבוע עם מושבות שקופות או שחורות מוקף במדיום אדום.

כמו כן, עבור E. coli צפוי כי יהיה עיכוב מוחלט, עבור פרוטאוס מיראביליס עיכוב חלקי או כולל; אם הוא יגדל זה יעשה זאת במשורה והמושבות יהיו שחורות מוקפות בצבע אדום בינוני.

הפניות

1. מעבדות BD. VJ (פוגל וג 'ונסון אגר). 2006. זמין בכתובת: bd.com
2. מעבדות בריטניה. פוגל - ג'ונסון אגר. 2015. זמין ב: britanialab.com
3. מעבדות בריטניה. אשלגן טלוריט. 2015. זמין ב: britania.com
4. מעבדה להנדסה. פוגל - ג 'ונסון בינוני אגר. 2018. זמין ב: heedialabs.com/TD/MU023.pdf
5. פוגל - בסיס אגר ג 'ונסון. מדריך למיקרוביולוגיה של Merck. מהדורה 12, עמ '502-503. זמין ב: משתמשים / צוות / הורדות
6. תורמים של ויקיפדיה, "Ágar Vogel Jonhson", ויקיפדיה לאנגלית אנציקלופדית,   להפיץ אותם: wikipedia.org.
7. תקן ונצואלה Covenin 1292-89. (1989). מזון בידוד וספירה סטפילוקוקוס אאורוס. זמין ב:sencamer.gob.ve