בסיס אגר ירוק בהיר, הכנה ושימושים

ה אגר ירוק בהיר זה בינוני תרבות מוצק, עם מידה גבוהה של סלקטיביות. הוא משמש אך ורק לבידוד של זנים של סלמונלה סוג, עם זאת יש כמה יוצאים מן הכלל, כגון מינים טיפי ו paratyphi כי לא לגדול במדיום זה.

החיפוש אחר סוג סלמונלה שכיח בדגימות של צואה, מים או מזון. במובן זה, המדיום הזה יכול להיות מאוד שימושי. אגר זה נוצר בשנת 1925 על ידי Kristensen, Lester ו יורגנס, מאוחר יותר שונה על ידי קאופמן.

הוא מורכב pluripeptonas מעיניה פפטי של רקמת בעלי חיים העיכול הלבלב של קזאין, מכיל גם שמרים לחלץ, נתרן כלורי, לקטוז, סוכרוז, אדום פנול, ירוק בהיר אגר אגר.

הוא מאופיין על ידי היותו בינוני inhospitable מאוד עבור רוב החיידקים, לטובת הצמיחה של סלמונלה, אבל כמה קוליפורמים מסוגלים להתקיים בו, מתפתח חלש.

חשוב להדגיש כי במדיום זה הסוג Shigella אינו גדל וגם לא סלמונלה טיפימוריום, ני סלמונלה פאראטיפי. לכן, אם זה רצוי לבודד מיקרואורגניזמים אלה, אמצעים אחרים יש להשתמש, כגון אגר XLD, בין היתר..

אינדקס

• 1 קרן
  • 1.1 אגר ירוק בהיר
  • 1.2 וריאנטים של אגר ירוק בהיר (BGA)
• 2 הכנה
• 3 שימושים / יישומים
• 4 בקרת איכות
• 5 הפניות

קרן

אגר ירוק בהיר

כל אחד מהרכיבים המרכיבים את המדיום יש פונקציה מסוימת הקובעת את המאפיינים ואת המאפיינים של אגר.

Pluripeptonas ואת תמצית של שמרים הם המקור של חומרים מזינים מאיפה מיקרואורגניזמים לקחת את החנקן ומינרלים הדרושים לפיתוח שלהם. לקטוז וסוכרוז הם מקורות אנרגיה למיקרואורגניזמים המסוגלים להתסיס אותם.

הירוק הבהיר הוא החומר המעכב המונע התפתחות של חיידקים חיוביים ל- Gram ומספר גדול של מיקרואורגניזמים שלילי של גראם.

נתרן כלורי מספק יציבות אוסמוטית למדיום. בעוד פנול אדום הוא אינדיקטור של pH, הוא הופך צבע בעת גילוי הייצור של חומצות מ תסיסה של פחמימות.

המושבות הלא מתסכלות של לקטוז וסוכרוז גדלות במדיום זה של צבע לבן, ורוד או שקוף, על רקע אדום. לדוגמה, חיידקים של סלמונלה סוג.

בעוד חיידקים לקטוז התוססת או סוכרוז מסוגל לגדול במדיום זה, הם מפתחים ירקרק צהוב או ירוק מושבות צהובים על רקע צהוב ירוק. לדוגמה, Escherichia coli ו Klebsiella דלקת ריאות.

גרסאות של אגר ירוק בהיר (BGA)

ישנם גרסאות אחרות של אגר ירוק בהיר; novobiocin ירוק אגר גלוקוז בהיר (NBG) ו novobiocin אגר ירוק בהיר לקטוז גליצרול (NBGL).

נוביוביוצין אגר גלוקוז ירוק בהיר (NBG)

מכיל אגר סויה טריפטיקאז, ציטראט אמוניום Ferric, pethahydrate נתרן thiosulfate, פנול אדום, גלוקוז, ירוק בהיר, novobiocin ומים מזוקקים.

משמש לבידוד של מושבות סלמונלה מדגימות צואה.

במקרה זה ירוק בהיר novobiocin הם חומרים מעכבים המונעים את הצמיחה של חיידקים חיוביים גרם כמה מיקרואורגניזמים שלילי גרם.

נתרן thiosulfate הוא המקור של גופרית ו ferric ציטראט הוא המקור של ברזל, הן נחוצות כדי לחשוף את הייצור של מימן גופרתי דרך היווצרות של משקע שחור של גופרית Ferric.

גלוקוז הוא פחמימות תוססת ואת הפנול האדום הוא מחוון pH.

במדיום זה מושבות סלמונלה מתפתחות עם מרכז שחור מוקף בהילה אדמדמה ואחריה אזור גלוי וברור. כמה זנים של סיטרובקטר לייצר מושבות זהות סלמונלה.

ירוק בהיר novobiocin אגר לקטרוז גליצרול (NBGL)

בינוני זה מכיל אגר סויה טריפטיקאז, ציטרט אמוניום פריק, thiosulfate נתרן, לקטוז, גליצרול, ירוק בהיר, novobiocin ומים מזוקקים.

ההבדל של המדיום הזה עם הקודם הוא כי גלוקוז מוחלף על ידי לקטוז וגליצרול אדום פנול אינו משמש.

המדיום משמש גם לבידוד מינים סלמונלה, המושבות לפתח שחור, על ידי הפקת מימן גופרתי.

רק מושבות שאינן מייצרות חומצה מ גליצרול או לקטוז להשיג H הייצור₂זה מספיק, כי pH נמוך מפריע להיווצרות של H₂ש 'זה גורם מושבות חסרות צבע עבור רוב פרוטאוס ומינים Citrobacter.

הכנה

-לשקול 58 גרם של המדיום מיובש מסחרית. מוסיפים אותו בליטר מים מזוקקים. מערבבים, לתת לעמוד כמה דקות להגיש את ההכנה למקור חום עד שהוא מתמוסס לחלוטין.

-החיטוי על 121 מעלות צלזיוס במשך 15 דקות, לא יעלה על זמן העיקור.

-בואו לעמוד ולהגיש אפילו חם צלחות פטרי סטריליות. ה- pH הסופי צריך להיות 6.9 ± 0.2.

-אפשר לחזק ולאחסן במקרר עד לשימוש. לפני שתילת הצלחות צריך לקחת טמפרטורת החדר.

-המדיום אבקה הוא ירוק ומוכן לקחת כתום חום או אדמדם, צבע ירוק, בהתאם pH ואת בית מסחרי. צבע חום מאוד מעיד כי אגר היה יתר על המידה.

-לאחר אגר הוא מגובש זה לא מומלץ כדי recast, כמו המדיום מתדרדר.

שימושים / יישומים

מדיום זה משמש לחיפוש של זנים של סלמונלה סוג מן דגימות צואה ומוצרי חלב, בין היתר..

כפי שהוא בסביבה inhospitable למדי, רצוי לשתול inoculum שופע אם המדגם הישיר משמש. אחרת, העשרה מוקדמת והעשרה של הדגימות צריך להיעשות לפני השתילה במדיום זה.

כמו זנים מסוימים של סלמונלה הם מעוכבים או לגדול עם קושי, רצוי ללוות את המדיום עם אגרס סלקטיבי אחרים עבור סלמונלה.

כל המושבה עם סלמונלה אופייני חייב להיות נתון לבדיקות ביוכימיות עבור זיהוי מוחלט.

בקרת איכות

כדי לבדוק את התפקוד הטוב של המדיום אגר בהיר ירוק, זנים ATCC ניתן להשתמש כדי לבחון את הפיתוח של אותו על זה..

הזנים הנפוצים ביותר המשמשים לבקרת איכות הם: סלמונלה אנטריטידיס ATCC 13076, סלמונלה טיפימוריום ATCC 14028, פרוטאוס מיראביליס ATCC 43071, דלקת ריאות קלבסילה ATC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  שיגלה ATCC 12022, סטפילוקוקוס אאורוס ATCC 6538.

הראשון 3 חייב לתת ורוד או מושבות שקופות לבן על רקע אדום. סלמונלה עם התפתחות טובה פרוטאוס עם צמיחה דלילה או קבוע.

Klebsiella ו Escherichia צפויים צהוב צהבהב מושבות עם רקע צהוב במקרה של Shigella ו Staphylococcus צריך להיות מעוכב.

המדיום המיובש צריך להיות מאוחסן בטמפרטורת החדר, במקום יבש, כי המדיום הוא מאוד hygroscopic.

הפניות

1. דיקו פרנסיסקו סוריה מלגוויזו מעבדה ס. אגר ירוק מבריק. 2009
2. המעבדה הבריטית אגר ירוק בהיר. 2015.
3. מעב. א.ד. מבריק אגר ירוק. 2013.
4. Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Win W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. (מהד 'ה -5). ארגנטינה, עריכה Panamericana S.A..
5. פורבס B, סחם D, Weissfeld A. 2009. אבחון מיקרוביולוגי של ביילי & סקוט. 12 ed. ארגנטינה Panamericana S.A העריכה