שתף:
סויה אגר Tripticaseína יסוד, הכנה ושימושים
ה אגר סויה trypticasein או אנטר סויה trypticase הוא מוצק, לא סלקטיבי ומזין תרבות מזין. זה מיועד עם האותיות TSA עבור ראשי התיבות שלה באנגלית Trypticase סויה אגר. הוא מורכב טריפטין, סויה פפטון, נתרן כלורי ו אגר אגר.
בשל כוחו התזונתי הגבוה, הוא אידיאלי לטיפוח של מיקרואורגניזמים תובעניים ותובעניים. המדיום ללא תוספות נוספות אינו מומלץ לתרבויות ראשוניות, אך הוא שימושי מאוד עבור זנים טהורים מתרבים ושמירתם בת קיימא, בין שימושים אחרים.
כמו כן, אגר זה משמש כבסיס להכנת מדיה מועשר כגון אגר דם, במיוחד כאשר הוא נדרש כדי לבחון את דפוסי המוליזה ואת לעלות את המסה של optoquine bacitracin, נדרש באבחון של סטרפטוקוקוס דלקת ריאות ו סטרפטוקוקוס פיוגנים בהתאמה.
מצד שני, בשילוב עם אנטיביוטיקה כדאי לבודד מיקרואורגניזמים אנאירוביים פקולטטיביים וקפדניים של חשיבות קלינית מדגימות עם צמחייה מעורבת..
לבסוף, ההרכב של אגר סויה tripticasein והביצועים שלה עונה על הדרישות שנקבעו על ידי pharmacopoeias שונים (אירופה, יפנית וצפון אמריקה).
אינדקס
- 1 קרן
- 2 הכנה
- 2.1 Tripticasein לוחות אגר סויה
- 2.2 Tripticasein לוחות אגר סויה בתוספת דם
- 2.3 Tripticasein לוחות אגר סויה להשלים עם דם מחומם
- 2.4 אוכפים של אגר סויה טריפטיקזין
- 3 שימושים
- 4 זרע
- 5 בקרת איכות
- 5.1 בקרת סטריליות
- 5.2 בקרת צמיחה
- 5.3 שליטה על צמיחה דפוס של המוליזה של אגר טריפטיצין סויה בתוספת דם
- 6 הפניות
קרן
לקבלת התפתחות נאותה של חיידקים יש צורך נוכחות של תרומות האנרגיה, כגון חומצות אמינו, ויטמינים, בסיסים purine ו pyrimidic.
במובן זה, טריפטין סויה פפטון לספק אלה חומרים מזינים מיקרואורגניזמים, ובכך לאפשר את הפיתוח המלא שלהם. עם זאת, עבור חיידקים תובעניים יש צורך להשלים אגר זה עם דם defririnated או דם מחומם כדי להגדיל את העשרה.
מצד שני, אם מתווספים אנטיביוטיקה למדיום, הוא הופך למדיום סלקטיבי. אתה יכול גם להוסיף 0.6% תמצית שמרים לטובת בידוד של מינים של ליסטריה הסוג, תוך הוספת cyistine tellurite ו דם טלה הוא אידיאלי עבור Corynebacterium diphteriae.
לבסוף, נתרן כלורי נותן את האיזון האוסמוטי למדיום אגר מספק עקביות מוצקה.
הכנה
Tripticasein לוחות אגר סויה
כדי להכין אגר סויה trypticasein, 40 גרם של המדיום מסחרי מיובש יש לשקול בקנה מידה דיגיטלי. מתמוסס בליטר של מים מזוקקים הכלולים בפיולה.
תערובת מותר לעמוד במשך 5 דקות ולאחר מכן הביא מקור חום לסייע בפירוק של המדיום. זה צריך להיות עורר לעתים קרובות והשאיר לרתיחה במשך 1 או 2 דקות. לאחר מכן, המדיום הוא עיקור החיטוי על 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות.
אפשר להתקרר ל 50 מעלות צלזיוס ולהפיץ בצלחות פטרי סטריליות. בואו לחזק, להפוך, סדר בלוחות וחנות במקרר.
ה- pH הסופי של המדיום צריך להיות 7.3 ± 0.2.
יש לקחת בחשבון כי צבע של המדיום תרבות מיובש הוא בז 'בהיר יש לאחסן בין 10 ל 35 ° C, במקום יבש.
מצידה, אגר מוכן הוא ענבר בהיר. צלחות מוכן צריך להיות מאוחסן במקרר (2 עד 8 מעלות צלזיוס) עד לשימוש.
הצלחות חייבות להגיע לטמפרטורת החדר לפני השימוש בהן.
טריפטיצין צלחות אגר סויה בתוספת דם
אגר דם מוכן על ידי הוספת דם 5% defibrinated בזמן קירור tryaricasein אגר סויה ב 50 ° C. תערובת הוא homogenized על ידי סיבוב עם תנועות עדינות.
מגישים בצלחות פטרי סטרילי. צבע של המדיום צריך להיות אדום דובדבן.
צלחות אגר Tripticasein אגר בתוספת דם מחומם
כדי להכין את אגר הדם מבוסס TSA, ההליכים המתוארים לעיל זהים, אבל כאשר עוזבים את החיטוי מותר לעמוד עד הטמפרטורה של המדיום הוא בין 56 ל 70 מעלות צלזיוס. באותו זמן הדם מוצב ומערבב עד שהמדיום הופך חום.
מגישים בצלחות פטרי סטרילי. צבעו של המדיום הוא חום שוקולד.
דפנות של אגר סויה טריפטיקזין
ההליך להכנת אגר הוא זהה לזה המתואר צלחות, עם ההבדל כי במקום לשרת את המדיום על צלחות פטרי, הוא מופץ בין 10 ל 12 מ"ל בצינורות עם מכסה Bakelite לפני עיקור.
לאחר מכן, הצינורות הם autoclaved ב 121 מעלות צלזיוס במשך 15 דקות. כאשר הם עוזבים, הם נשענים בעזרת תמיכה ומאפשרים לעצמם להתמצק.
טריזים מוכנים נזרעים על ידי השטח לשמש כדי לשמור על מיקרואורגניזמים מסוימים שאינם תובעניים קיימא, עבור זמן נחוש.
שימושים
אגר סויה Trypticasein משמש במקרים הבאים:
-כבסיס להכין את אגר הדם הקלאסי המשמש באופן שגרתי ברוב המעבדות.
-בידוד של חיידקים תובעניים.
-תצפית על תבנית המוליזה.
-ביצוע בדיקות אבחון.
-כבסיס להכנת אגר דם מיוחד עבור Corynebacterium diphteriae, עם ציסטוריום ציסטין ו דם של כבש.
-כבסיס להכנת אגר דם טלה, יותר kanamycin- vancomycin לצמיחת של anaerobes, במיוחד Bacteroides sp.
-עבור תחזוקה של זנים שאינם דורשים (Bacterioteca).
-מיקרוביאלית ספירה אירובית במחקר הגבול מיקרוביאלית של מים, איכות הסביבה, מזון וקוסמטיקה דגימות.
נזרע
דוגמאות ניתן seeded ישירות על פני השטח של אגר סויה trypticasein בתוספת דם או תוספים אחרים. הוא נזרע על ידי תשישות.
בעוד, tripticasein לוחות אגר סויה ללא תוספים משמשים בדרך כלל זנים מיקרוביאליים תת (חיידקים או שמרים).
בקרת איכות
בקרת סטריליות
כדי לבדוק את העוקץ של התקשורת שונים מוכנים עם אגר סויה trypticasein, מומלץ לעשות את הפעולות הבאות: מכל אצווה מוכן, אחד או שני צלחות או צינורות צריך להיות מודגרות ללא חיסון ב 37 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות כדי להדגים סטריליות. בכל המקרים הוא חייב להישאר ללא צמיחה.
אם זיהום נמצא, יש לבטל את כל המגרש.
בקרת צמיחה
כדי ללמוד את התפקוד התקין של אגר סויה trypticasein, זנים חיידקים הבאים ניתן להשתמש: Escherichia coli ATCC 8739, סטפילוקוקוס אאורוס ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 ו אנטוקוקוס פקאליס ATCC 29212.
הזנים נזרעים מודגרת ב Aerobiosis ב 37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות.
בכל המקרים הצמיחה צריכה להיות משביעת רצון.
אתה יכול גם להשתמש פטריות כמו קומפלקס קנדידה אלביקנים ATCC 10231 ו אספרגילוס ניגר ATCC 16404. צמיחה טובה צפויה עבור שני זנים.
בקרת צמיחה דפוס המוליזה של אגר סויה tripticasein בתוספת דם
כדי לוודא את תפקוד תקין של אגר דם מוכן עם בסיס זה, הזנים הבאים ניתן להשתמש: סטרפטוקוקוס פיוגנים ATCC 19615, סטרפטוקוקוס דלקת ריאות ATCC 6305 ו סטרפטוקוקוס דלקת ריאות ATC 49619.
הם נזרעים מודגרת על 37 מעלות צלזיוס ב microaerophilicus במשך 24 שעות.
בכל המקרים, הצמיחה צריכה להיות משביעת רצון, תוך התחשבות בכך ס. פיוגנים בטא המוליזה (הילה ברורה סביב המושבה) ובשני זנים של דלקת ריאות אלפא המוליזה (הילה ירקרק סביב המושבות) יש לראות.
הפניות
- תורמים ויקיפדיה. טריפטיקאז אני אגר. ויקיפדיה, האנציקלופדיה החופשית. 17 בדצמבר 2018, 15:47 UTC. זמין בכתובת: https://en.wikipedia.org
- מעבדות בריטניה. אגר סויה טרייטין. 2015. זמין ב: britanialab.com
- מעבדות Neogen סויה טריפטיך. זמין ב: foodsafety.neogen.com
- פורבס ב ', סחם ד', וייסנפלד א. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי & סקוט. 12 ed. ארגנטינה Panamericana S.A העריכה.
- מעבדות BD טריפטיקאז אני אגר. 2014. זמין בכתובת: .bd.com