MacConkey אגר יסוד, הכנה ושימושים
ה MacConkey אגר זהו בינוני תרבות מוצק המאפשר בידוד יחיד של גראם bacilli שלילית. מסיבה זו הוא בינוני סלקטיבי וגם מאפשר להבחין בין התסיסה התסיסה bacilli של לקטוז, מה שהופך אותו בינוני דיפרנציאלי. זהו אחד המדיה התקשורת הנפוץ ביותר במעבדה מיקרוביולוגיה.
מדיום זה משמש בעיקר לבידוד של גראם שלילי bacilli השייכים למשפחה Enterobacteriaceae, כולל מינים אופורטוניסטים ואנתרופתוגניים.
זה יכול לשמש גם לבידוד bacilli enteric אחרים המאכלסים את מערכת העיכול, אבל לא שייך Enterobacteriaceae, כמו Aeromonas sp, Plesiomonas sp, בין היתר.
לבסוף, הוא יכול לבודד אחרים שלילי, לא תוסס גלוקוז bacilli כי הם נמצאים בסביבה, מים או קרקעות, אבל אשר לפעמים יכול להיות פתוגנים אופורטוניסטי כגון Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, אלקליין sp, Chromobacterium violaceum, Stenotomonas maltophilia, בין היתר.
אינדקס
- 1 קרן
- 1.1 MacConkey אגר
- 2 הכנה
- 3 שימושים של אגר מקונקי מקובל
- 4 גרסאות אחרות של אגר MacConkey
- 4.1 אגר MacConkey עם סורביטול
- 4.2 MacConkey אגר ללא סגול קריסטל, או מלח
- 4.3 אגר MacConkey עם cefoperazone
- 4.4 MacConkey Agar מוכן עם 10% מי ים v / v
- 5 הפניות
קרן
MacConkey אגר
את היסודות של המדיום הזה אפשר להסביר באמצעות תיאור מרכיביו, משום שלכל אחד יש מטרה הקובעת את מקומו.
מלחי מרה וגביש קריסטל
במובן זה, אגר MacConkey יש הרכב מורכב. קודם כל הוא מכיל מלחים מרה סגול.
גורמים אלו אחראים על עיכוב הצמיחה של חיידקים חיוביים ל- Gram וחלקם דורשים חיידק שלילי של גראם. בתורו הוא מעדיף את הפיתוח של גראם שלילי bacilli שאינם מושפעים על ידי חומרים אלה. לכן זה בינוני סלקטיבי.
הוא אמר להיות בררני מעט לעומת מדיה אחרים, כי גם לעכב את הצמיחה של חיידקים חיוביים גרם וגם של רוב חיידקים גראם שלילי.
זה מאוד סלקטיבי עבור סוג מסוים, כגון אגר TCBS לבידוד של ויבריו כולרה ו מינים דומים אחרים halophilic ו alkalophilic.
פפטונים, פוליפטונים וקטוז
מכיל חומרים המספקים את החומרים המזינים הדרושים למיקרואורגניזמים המתפתחים במדיום זה, כגון פפטונים, פוליפטונים ולקטוז.
לקטוז היא נקודת המפתח עבור המדיום להיות בינוני דיפרנציאלי, כי מיקרואורגניזמים שיש להם את היכולת לקרוס לקטוז יפתחו מושבות ורודות חזקות.
כמה חיידקים יכולים להתסיס לקטוז לאט או חלש, פיתוח מושבות ורודות בהירות ולהישאר לקטוז חיובי.
אלה שאינם לתסיס לקטוז להשתמש peptones כמקור אנרגיה, לייצר אמוניה, אלקליזציה בינוני. לכן, המושבות שמקורן הן חסרות צבע או שקופות.
מחוון PH
שינוי צבע מושגת באמצעות תרכובת חיונית אחרת שיש לה אגר MacConkey. מתחם זה הוא מחוון pH, אשר במקרה זה הוא נייטרלי אדום.
התסיסה של לקטוז מייצרת את ייצור החומצות המעורבות. הם לחמצן את המדיום ב pH מתחת 6.8..
זה גורם מחוון pH לפנות לכיוון גוון ורוד עז. עוצמת הצבע עשויה להשתנות בהתאם ל- pH הסופי.
מים מזוקקים, נתרן כלורי ו אגר
מצד שני, הוא מכיל מים מזוקקים ונתרן כלורי שנותנים את שיווי המשקל ואת שיווי המשקל האוסמוטי למדיום. לבסוף, המדיום מכיל אגר, שהוא הבסיס המספק את העקביות של המדיום מוצק.
את המדיום מוכן MACConkey אגר חייב להיות pH הסופי מותאם 7.1 ± 0.2..
הכנה
עבור ליטר אחד של אגר MacConkey, 50 גרם של המדיום מיובש יש לשקול, ואז הניח פיולה ו מומס ליטר אחד של מים מזוקקים. לאחר 10 דקות של מנוחה זה מחומם על ידי ערבוב כל הזמן עד שהוא רותח במשך 1 דקות.
לאחר מכן מקום Fiola ב החיטוי לעקר ב 121 מעלות צלזיוס במשך 20 דקות. בסוף הזמן, הוא מוסר מן החיטוי מותר מגניב לטמפרטורה של 45 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן שימש בצלחות פטרי סטרילית בתוך מכסה המנוע זרימה למינרית או מול מבער בונזן..
אפשר לחזק ולאחסן בעל צלחת הפוכה לקרר ב 2-8 מעלות צלזיוס עד לשימוש.
כדי להשיג אגר MacConkey כי מעכב את האפקט החריפה המיוצר על ידי סוג פרוטיוס, אגר מלח נמוך MacConkey משמש..
שימושים של אגר מקונקי מקובל
אגר MacConkey נכלל בכל קבוצה של התקשורת תרבות מסודרים לזריעה של דגימות קליניות שהתקבלו במעבדה. זה שימושי גם במיקרוביולוגיה של מזון ובמיקרוביולוגיה סביבתית.
מגוון של גראם שלילי bacilli כי לגדול בינוני זה להביע מאפיינים פנוטיפי המסייעים אבחנה משוערת של המין המדובר. לדוגמה, גודל, צבע, עקביות וריח של המושבות הם חלק מן המאפיינים שיכולים להנחות.
בסביבה זו, מינים של Escherichia coli, Klebsiella sp ו Enterobacter sp לייצר מושבות ורוד חזק, מוקף באזור של מיץ מרה.
עד כמה חיידקים כמו Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp ו Hafnia sp הם יכולים להופיע ללא צבע לאחר 24 שעות או ורוד בהיר 24-24 שעות.
כמו כן, הגנרלה פרוטיוס, אדואדסיאלה, סלמונלה ושיגלה מייצרות מושבות חסרות צבע או שקופות.
גרסאות אחרות של אגר MacConkey
ישנם גרסאות אחרות של אגר MacConkey כי יש מטרות ספציפיות. הבא הם מוזכרים:
MacConkey אגר עם sorbitol
מדיום זה נועד להבחין בין זן enteropathogenic (Escherichia coli אנטרוממורגיאגי O157: H7) של שאר הזנים של Escherichia coli.
מדיום זה משנה את לקטוז הפחמימות עבור סורביטול. זני E. coli enterohaemorrhagic O157: H7 שונים משאר כי הם לא תסיסה סורביטול ולכן המושבות שקוף מתקבלים, אבל שאר הזנים E. coli אם הם תסיסה סורביטול המושבות ורוד חזק.
MacConkey אגר ללא סגול קריסטל, או מלח
אגר זה שונה בהרבה אגר MacConkey קלאסי, כפי שאין לו סגול קריסטל, חיידקים חיוביים גראם יכול לגדול.
מצד שני, היעדר מלח מעכב את המראה של נחיל על אגר המיוצר על ידי כמה bacilli אנטריק, כגון אלה של הסוג פרוטאוס, ובכך להקל על הבידוד של כל החיידקים הקיימים, כולל חיידקים חיוביים ל- Gram.
MacConkey אגר עם cefoperazone
גרסה זו של אגר MacConkey תוכנן לבודד בתחילה Laribacter hongkongensis ומאוחר יותר הבינו שזה מועיל לבידוד ארקובקטר בוטלרי. אשניהם מעוקלים מעט שלילי גראם bacilli עמיד cefoperazone.
חיידקים אלה נקשרו לאחרונה כגורמים של דלקת גסטרואנטריטיס ושלשולים שנרכשו אצל אנשים אסיאתיים ואירופיים, המתגלים כשני פתוגנים חזקים.
אנטיביוטיקה מאפשרת לעכב את הצומח הנלווה של מערכת העיכול, אשר מעדיף את הפיתוח של חיידקים אלה, מונע מהם הולך מעיניהם, שכן הם דורשים 72 שעות לגדול.
MacConkey Agar מוכן עם 10% מי ים v / v
גרסה זו שימושית להערכת מחוונים בריאותיים חיידקים של זיהום צואה, כולל קוליפורמים הכולל קוליפורמים צואתיים במי מלח מלוחים (חופים מפרצים).
Cortez et al 2013 הראו כי המדיום המוכן בדרך זו מגדיל באופן משמעותי את ההתאוששות של מיקרואורגניזמים אלה בסביבה מלוחים, בהשוואה לשימוש אגר MacConkey מוכן עם מים מזוקקים..
הסיבה לכך היא כי המדיום שונה מגרה את הצמיחה של חיידקים, כי הם מבחינה פיזיולוגית במצב של תרדמה "קיימא אבל לא מטפח", ולכן הם לא ניתן להחלמה בתקשורת קונבנציונאלי.
הפניות
- לאו SK, Woo PC, Hui WT, et al. שימוש אגר cefoperazone MacConkey לבידוד סלקטיבי של Laribacter hongkongensis. מיקרוביול. 2003; 41 (10): 4839-41.
- "מאקוני אגר". ויקיפדיה, האנציקלופדיה החופשית. 4 אפריל 2018, 18:16 UTC. 29 דצמבר 2018, 15:22 en.wikipedia.org
- פורבס ב ', סחם ד', וייסנפלד א. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי & סקוט. 12 ed. ארגנטינה Panamericana S.A העריכה.
- Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Win W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. (מהד 'ה -5). ארגנטינה, עריכה Panamericana S.A..
- Cortez J, Ruiz Y, מדינה L, Valbuena O. השפעת התקשורת תרבות מוכן עם מי ים על מחוונים בריאותיים במימי הים של ספא Chichiriviche, המדינה Falcón, ונצואלה. Rev סוק מיקרוביול 2013; 33: 122-128
- García P, Paredes F, פרננדז דל באריו מ. (1994). מיקרוביולוגיה קלינית מעשית. אוניברסיטת קדיז, מהדורה שנייה. שירות פרסומי UCA.