שתף:
אגר Hektoen הבסיס, הכנה ושימושים
ה אגר Hektoen או אקסטרים אקטואר hectoen הוא בינוני, סלקטיבי בינוני דיפרנציאלי תרבות. הוא הוקם במכון הקטואן על ידי המלך ומצגר על מנת לבודד את החיידקים האנתרופאטוגניים של הגנרל שיגלה וסלמונלה..
המדיום הוא מורכב peptone proteose, תמצית שמרים, מלחי מרה, לקטוז, סוכרוז, salicin, thiosulfate נתרן, נתרן כלורי, ציטראט ברזל, ציטרט אמוניום, ברומותימול כחול, fuchsin חומצה ו אגר. ניסוח זה מאפשר להבדיל בין הגנרלה שיגלה וסלמונלה משאר החיידקים המסוגלים לגדול במדיום זה.
אמנם יש אמצעים אחרים עם אותה פונקציה כמו אגר hektoen, זה מציג יתרון גדול יותר לעומת אמצעים אחרים, במיוחד כאשר אתה רוצה לשחזר מינים Shigella.
המינים של שני הגנים מייצרים בעיות גסטרואינטסטינאליות חמורות אצל בני אדם בשל צריכת מזון מזוהם; ולכן השידור הוא צואה - בעל פה. לכן השימוש אגר Hektoen מצוין בעיקר ניתוח מיקרוביולוגי של דגימות צואה ומזון..
אינדקס
- 1 קרן
- 2 הכנה
- 3 השתמש
- 4 בקרת איכות
- 5 מגבלות
- 6 הפניות
קרן
חציר אגר מכיל פפטונים ותמציות שמרים כמקור של חומרים מזינים, המספקים את המרכיבים החיוניים לפיתוח מיקרוביאלי.
עם זאת, יש גם מלחי מרה כי לפעול על ידי עיכוב הצמיחה של כמה חיידקים, במיוחד גרם חיובי כמה גראם שלילי. מסיבה זו היא נחשבת למדיום סלקטיבי.
מצד שני, אקט hektoen הוא בינוני דיפרנציאלי. מאפיין זה מוענק על ידי נוכחות של פחמימות להתססה כגון לקטוז, sacarora ו salicin, עם אינדיקטור pH המערכת, המיוצג על ידי bromothymol Fuchsin כחול חומצה.
כל החיידקים המסוגלים לגדול במדיום זה שאינם שייכים לסוג של סלמונלה ושיגלה יפתחו מושבות סלמון או כתום, פרט לסוג פרוטיוס. הסיבה לכך היא התסיסה של אחד או כמה של פחמימות נוכחי, אשר acidifies המדיום, אשר גורם מחוון pH להפוך.
בינתיים, סוג Shigella ו סלמונלה אינם מסוגלים להתסיס כל פחמימות נוכחיות, באמצעות peptones רק כמקור אנרגיה, אשר alkalinized בינוני ולכן המושבות שלה הן ירוקות-כחלחלות.
גם במדיום זה ניתן להבחין חיידקים מסוגל להרכיב מימן גופרתי (גז חסר צבע). נתרן thiosulfate פועל כמקור של גופרית בעוד ציטראט ברזל הוא סוכן חושף. שני המרכיבים מאפשרים את היווצרותו של משקע שחור של גופרית ברזל המעיד על התגובה.
משקע שחור במרכז המושבה עם הילה שקופה מסביב נותן מראה עין דגים. מאפיין זה מרמז על נוכחותו של סוג סלמונלה.
לבסוף, נתרן כלורי שומרת על איזון אוסמוטי אגר נותן את עקביות מוצק בינוני.
הכנה
לשקול 76 גרם של המדיום מיובש להתמוסס ליטר אחד של מים מזוקקים. לנער את התערובת במרץ ולאחר מכן לתת לו לנוח 10 עד 15 דקות. זה יכול להיות מחומם מבושל, נותן תנועות סיבובית עד להמסה מוחלטת שלה. המדיום הזה אינו אוטוקלאד.
כאשר המדיום מגיע לטמפרטורה של כ 45 מעלות צלזיוס, נפח של 20 מ"ל הוא ישירות שפכו לתוך צלחות פטרי סטרילית..
אגר מותר לחזק. באותו זמן הם מוכנים לשימוש. מומלץ להשתמש בהם באופן מיידי. אם הם אינם אפשריים, הם צריכים להישמר במקרר עד שהם משמשים.
הצלחות יש להסיר מוקדם מהמקרר לפני שתילת אותם לקחת טמפרטורת החדר.
ה- pH של המדיום צריך להיות 7.5 ± 0.2. צבעו של המדיום המיובש הוא סגול ומוכן הוא ירוק חום.
השתמש
השימוש אגר hektoen מומלץ לחפש את החיידקים של סוג Shigella ו סלמונלה בדגימות צואה ומזון..
היכולת לבודד חיידקים אלה אם המדגם בעבר broths מיוחדים, כגון סלניט, מרק ציסטין סלניט, מרק tetrathionate, מועשר והגביר בכך וכו '.
את inoculum חייב להיות חזק ו seeding נעשה על ידי הפשטה. הצלחות מודגרת על 37 מעלות צלזיוס למשך 24 עד 48 שעות ב Aerobiosis.
הדגירה מומלץ במשך 48 שעות, כי המאפיינים של המושבות ברורים יותר עבור הפרשנות שלהם בידול בשלב זה.
בקרת איכות
כדי לבצע בקרת איכות על המדיום הזה, זנים חיידקים מוסמכים משמשים, כגון: סלמונלה טיפימוריום ATCC 14028, סלמונלה אנטריטידיס ATCC 13076, שיגלה ATCC 12022 שיגלה סוני ATC 25931.
התוצאות הצפויות הן: סלמונלה וטיפוריום סלמונלה אנטריטידיס הם חייבים לפתח מושבות ירוקות כחולות עם או בלי מרכז שחור. בעוד מינים Shigella יגדל כמו מושבות כחול ירוק.
אתה יכול גם לכלול זנים של Escherichia coli ATCC 29212, פרוטאוס מיראביליס, דלקת ריאות קלבסילה ATC 700603, אנטוקוקוס פקאליס ATCC 29212 ו סטפילוקוקוס אאורוס ATCC 25923.
במקרים אלה המאפיינים הנצפים הם כדלקמן: E. coli ו ק. דלקת ריאות במדיום זה הם יפתחו מושבות סלמון לכתום, עם משקע של אותו צבע סביבם. בינתיים, Proteus יפתחו מושבות כחול ירוק עם או בלי מרכז שחור.
בזמן ס 'אאורוס ו E. faecalis צריך להיות מעוכב, לפעמים E. faecalis מצליח לגדול כמו מושבות צהובות, קטן מאוד.
מצד שני, מכיוון שמדיום זה אינו מעוקר בחיטוי, חשוב להעריך את הסטריליות של המדיום. לכן, כל אצווה מוכן צריך להיות מודגרות אחת לשתיים צלחות ללא inoculating ב 37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות ב Aerobiosis.
ברור שזה צפוי כי אין צמיחה מכל סוג שהוא על הצלחת.
מגבלות
-מינים Proteus יכול לפתח בסביבה זו ואת המאפיינים של המושבות שלהם יכול להיות מבולבל עם סלמונלה או מינים Shigella. מסיבה זו כל מושבה חשודה חייב להיות מאושר עם בדיקות ביוכימיות.
-יש צורך ללוות את השימוש במדיום זה עם אגרסים סלקטיביים פחות, שכן אם המיקרואורגניזם המבוקש נמצא בריכוזים נמוכים, הוא עלול שלא להתפתח במדיום זה.
-לא להתחמם יתר על המידה במהלך ההכנה שלה, שכן החום מוגזם משנה את הרכב המדיום.
-מושבות סלמונלה (Lactose-fermenting) סלמונלה בלתי מזוהות עשויות להיראות בלי משים.
הפניות
- תורמים ויקיפדיה. אגר מעי Hektoen. ויקיפדיה, האנציקלופדיה החופשית. 13 במרץ 2019, 23:38 UTC. זמין ב: .wikipedia.org / גישה 16 מרס 2019.
- מעבדות BD אקטואלית אגר (He Agar). 2013. זמין בכתובת: bd.com
- מעבדות בריטניה. ח לנת Electronicness agar. 2015. זמין ב: britanialab.com
- דיקו פרנסיסקו סוריה מעבדות מלגיזו. אגר אגר Hektoen. זמין ב: f-soria.es
- דיקו & BBL ידני, Hektoen אנטיק אגר. מהדורה שנייה. זמין ב: bd.com/europe