קרן אגר קלד, שימושים והכנה

ה אגר Cled (Cystine-Lactose-Electrolytes-Deficient) הוא בינוני בינוני תרבות מוצק, המשמש לאבחון זיהומים בדרכי השתן. הרכב המדיום התרבות נועד לצמיחה טובה של פתוגנים בדרכי השתן והוא אידיאלי לכימות של יחידות להרכיב המושבה (CFU).

המדיום CLED תרבות אינו סלקטיבי, שכן גראם שלילי גם גראם חיובי מיקרואורגניזמים יכול לגדול בו. אבל זה לא בעיה, שכן רוב זיהומים בדרכי השתן נגרמות על ידי סוג אחד של מיקרואורגניזם.

במקרה של זיהומים polymycbial 2 או 3 חיידקים שונים ניתן להשיג, אבל זה נדיר ביותר וברוב הזמן הוא דגימות מזוהמות.

בין החיידקים השליליים של הגראם שיכולים לצמוח במדיום זה הם הבצילי המשתייכים למשפחה Enterobacteriaceae וכן bacilli enteric אחרים, uropathogens להיות מבודדים לעתים קרובות בדגימות שתן, כדלקמן: Escherichia coli, דלקת ריאות של קלבסילה, פרוטאוס מיראביליס, Morganella מורגני, Pseudomonas aeruginosa, בין היתר.

כמו כן, בין חיידקים חיוביים גרם שיכולים לגדול במדיום זה הם Staphylococcus aureus, סטפילוקוקוס saprophyticus, אנטרוקוקוס faecalis, סטרפטוקוקוס agalactiae, sp Corynebacterium, sp לקטובצילוס והם יכולים אפילו לגדל שמרים, כמו המתחם קנדידה אלביקנים.

עם זאת, בשל ההרכב הכימי של המדיום הוא אינו מאפשר את הצמיחה של כמה תובעני genitourinary pathogens, כגון נייסריה גונוראהי, גרדנארלה נרתיקי, בין היתר.

אינדקס

• 1 קרן של אגר CLED
• 2 קרן של אגר CLED (בויס)
• 3 שימושים
  • 3.1 זריעת דגימות שתן
  • 3.2 פרשנות
  • 3.3 זיהוי
• 4 הכנה
• 5 הפניות

הקרן של אגר CLED

בינוני התרבות CLED יש כמקור אנרגיה מקור תמצית, הידרוליזה casein הלבלב וג'לטין הידרוליזה. הם מספקים את החומרים המזינים לפיתוח של חיידקים תובעני.

הוא מכיל גם ציסטין, חומצת אמינו המאפשרת את הצמיחה של קוליפורמים, להבדיל על ידי גודלו הקטן.

כמו כן, לקטוז מכיל פחמימות תוססות, מסיבה זו המדיום הוא דיפרנציאלי; להיות מסוגל להבחין בין חיידקים תוסס מן לקטוז שאינו מותסס.

חיידקי התססה להפוך להפוך את ה- pH של ייצור החומצה לפיתוח מושבות צהובות, ואילו חיידקים הלא תסיסה לא ליצור שינויים בסביבה, ובכך לוקחים את הצבע של אגר המקורי, ירוק.

התגובה תסיסה מתגלה בזכות נוכחות של מחוון pH, אשר במדיום זה הוא כחול bromothymol.

מצד שני, ריכוז אלקטרוליט נמוך של המדיום מעכב את הצמיחה הפולשנית טיפוסי של הסוג פרוטאוס, שנקרא אפקט נחיל. זה יוצר יתרון ביחס לאמצעים אחרים, שכן הוא מאפשר לספור את UFCs, כולל אם הסוג פרוטאוס קיים.

עם זאת, ריכוז נמוך של אלקטרוליטים מעכב את הצמיחה של כמה מינים של הסוג שיגלה, להיות זה חיסרון ביחס לאמצעים אחרים.

בסיס של אגר CLED (בויס)

יש וריאציה או שינוי של המדיום הזה נעשה על ידי בויס, אשר שולבו המקורי חומצה fuchsin הרכב (אינדיקטור Andrade) לתוך הרכב המקורי. זה פועל יחד עם כחול bromothymol כדי להבדיל בין תסיסה חיידקים שאינם מותסס.

ההבדל בין המדיום הקונבנציונלי לבין המדיום המתוקן הוא הצבע שאומץ על ידי המושבות. במקרה של לקטוז תסיסת חיידקים, מושבות לפתח כתום אדמדם עם הילה ורודה או אדומה, בעוד nonfermenters הם לאפור-כחלחל.

שימושים

אגר CLED משמש אך ורק עבור זריעת דגימות שתן. השימוש במדיום זה שכיח במיוחד במעבדות אירופה, בעוד שבאמריקה הוא פחות בשימוש.

איסוף המדגם חייב לעמוד בפרמטרים מסוימים לקבלת תוצאות אמינות, כולל:

• לא לוקח אנטיביוטיקה לפני לקיחת המדגם.
• רצוי לקחת את השתן מהשעה הראשונה של הבוקר, שכן הוא מרוכז יותר, כאשר לא ניתן לקחת דגימות בשיטות פולשניות.
• בזהירות לשטוף את איברי המין לפני לקחת את המדגם.
• מחק את זרם השתן הראשון ולאחר מכן למקם את המיכל.
• איסוף בין 25 ל 30 מ"ל של שתן במיכלים מסומנים סטרילי.
• קח מיד למעבדה מוקף קרח.
• זה חייב להיות מעובד לפני 2 שעות של פליטה או בקירור ב 4 מעלות צלזיוס למשך מקסימום של 24 שעות.

זריעת דגימות שתן

דגימת שתן חייב להיות מדולל 1:50.

לדילול, במקום 0.5 מ"ל של שתן של המטופל לדלל עם 24.5 מ"ל של תמיסה פיזיולוגית סטרילית.

למדוד 0.1 מ"ל של שתן מדולל לזרוע לכל פני השטח עם מרית drigalski על המדיום CLED. זוהי שיטת זריעת ציינו עבור ספירת מושבות. לכן הוא משמש בדגימות שתן, שכן התוצאות חייב לבוא לידי ביטוי CFU / ml.

עבור כימות של מושבות אלה, המשך כדלהלן: לספור מושבות ולהתרבות על ידי צלחת 10 ואז 50. זה משיג את המספר של שתן CFU / ml.

פרשנות

ספירת מעל 100,000 CFU / ml -Indica זיהום בדרכי השתן

ספירה מתחת 1000 CFU / ml- אין זיהום

ספירה בין 1000-10,000 CFU / ml - ספק, זיהום אפשרי, לחזור על המדגם לוקח.

זיהוי

המושבות הגדלות על אגר CLED צריך להיות גרם ו בהתאם המאפיינים morphotypeive של מיקרואורגניזם תת מסוימים תתבצע.

לדוגמה, אם זה גרגר שלילי של גראם זה יהיה נזרע על אגר MacConkey, שם התסיסה או לא של לקטוז הוא מאושש. בנוסף, אגר מזין מחובר לביצוע בדיקת oxidase.

במקרה של גראם מגלה גראם Cocci חיובי זה יכול להיות תת מתורבת אגר mannitol מלוח ב אגר תזונתי. בחודש האחרון, הבדיקה catalase מתבצעת. לבסוף, אם שמרים הם נצפו, זה יהיה נזרע על אגר Sabouraud.

מעבדות רבות למנוע את השימוש של המדיום CLED ומעדיפים להשתמש רק אגר דם, MacConkey ו אגר תזונתי לזרוע את דגימות שתן.

הכנה

בתוך בקבוקון עם ליטר אחד של מים מזוקקים, להמיס 36.2 גרם של אגר Cled אבקה. לאחר 5 דקות של מנוחה, לחמם את אגר resuspended, מערבבים כל הזמן עד רותחים במשך 1 דקות.

ואז לעקר ב 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות החיטוי. לאחר שהזמן הסתיים, הוא מוסר מן החיטוי מותר מגניב עד להגיע לטמפרטורה של 45 מעלות צלזיוס. לאחר מכן הוגשה בין 15 - 20 מ"ל בכל צלחת פטרי סטרילי.

הליך הגשת צלחות חייב להתבצע בתוך מכסה המנוע זרימה למינרית או מול מבער בונזן, כדי למנוע זיהום.

צלחות שימש מותר כדי לחזק, מסודרים בעל צלחת הפוכה ומאוחסנים במקרר (2-8 מעלות צלזיוס) עד לשימוש.

ה- pH הסופי של המדיום מוכן צריך להיות 7.3 ± 0.2.

הפניות

1. המלצות לאבחון מיקרוביולוגי של דלקת בדרכי השתן. צ'יל אינפקטול.  2001; 18 (1): 57-63. זמין ב: scielo.org.
2. Panchi ג זיהוי של סוכן חיידקים גורמת לזיהומים בדרכי השתן בחולים פנימיים עוברים צנתור שלפוחית ​​השתן. 2016. לתואר ראשון לעבוד כדי להגיש בקשה לתואר Licentiate במעבדה קלינית. האוניברסיטה הטכנית של אמבטו. אקוודור.
3. מעבדות בריטניה. חצי CLED. זמין ב: britanialab.com.
4. מעבדות Renylab הוראות שימוש, CLED Agar. 2013 זמין ב: www.renylab.ind.br.
5. מעבדות Cultimed מדריך בסיסי של מיקרוביולוגיה. זמין ב: ictsl.net.
6. Muñoz P, Cercenado E, Rodríguez-Créixems M, Díaz MD, Vicente T, Bouza E. האפשרות אגר CLED בשגרת התרבות שתן. הערכה פרוספקטיבית והשוואתית. אבחון Microbiol להדביק Dis. 1992; 15 (4): 287-90.
7. García P, Paredes F, פרננדז דל באריו מ. (1994). מיקרוביולוגיה קלינית מעשית. אוניברסיטת קדיז, מהדורה שנייה. שירות פרסומי UCA.