ביירד פרקר אגר יסוד, הכנה ושימוש

ה ביירד פרקר אגר זהו בינוני מוצק, סלקטיבי ודיפרנציאלי תרבות. הוא נוצר בשנת 1962 עבור זיהוי ו coagulase חיובי Staphylococcus ספירה (סטפילוקוקוס אאורוס).

היא כוללת hydrolyzate קזאין הלבלב, תמצית בשר, תמצית שמרים, ליתיום כלוריד, גליצין, פירובט נתרן, אשלגן tellurite, אגר ו אמולסיה חלמון.

ביירד פרקר אגר מבוסס על היכולת של ס 'אאורוס של הפחתת tellurite והפקת lecithinase. שני המאפיינים יוצרים מושבה בעלת מאפיינים ספציפיים למין זה. לכן, הוא מציע יעילות רבה בזיהוי של מיקרואורגניזם זה.

המושבות הטיפוסיות של ס 'אאורוס הם שחורים או אפורים כהים, עם גבול חסר צבע והילה ברורה המקיפה אותם, ומבדילים את עצמם משאר המיקרואורגניזמים. זה הפתוגן ניתן למצוא דוגמאות קליניות, מים, קוסמטיקה ומזון גולמי או מבושל.

אבחון או איתור הוא קריטי, בגלל מגוון פתולוגיות מיוצר כמו הרעלת מזון, תסמונת עור מפוסטרת, תסמונת הלם רעילה, מורסות, דלקת קרום מוח, אלח דם, דלקת פן לב, בין יתר.

אינדקס

• 1 קרן
  • 1.1 הספק תזונתי
  • 1.2 סלקטיבי
  • 1.3 דיפרנציאלי
• 2 הכנה
  • 2.1 ביצה חלמון ביצה
  • 2.2 אשלגן Tellurite ב 1% w / v
  • 2.3 הכנת המדיום התרבותי
• 3 השתמש
  • 3.1 דגימות קליניות
  • 3.2 דגימות מזון
  • 3.3 דגימות מים
• 4 בקרת איכות
• 5 המלצות
• 6 הפניות

קרן

כוח מזין

hydrolyzate קזאין לבלב, תמצית בשר תמצית שמרים הם מקורות של חומרים מזינים, ויטמינים ומינרלים דרושים התפתחותם של חיידקים הכולל, בעוד פירובט גליצין הם תרכובות בקידום צמיחה ספציפית סטפילוקוקוס אאורוס.

סלקטיבי

ביירד פרקר אגר הוא סלקטיבי כי הוא מכיל חומרים המעכבים את הצמיחה של הצומח הנלווה, תוך קידום הפיתוח של ס 'אאורוס. תרכובות מעכב הן ליתיום כלורי ו Tellurite אשלגן.

דיפרנציאלי

משמעות הדבר היא מאפשרת להבדיל ס 'אאורוס של שאר cagulase שלילי Staphylococci. ס 'אאורוס יש את היכולת להפחית tellurite שחור שחור חינם tellurium, ויצרו מושבות אפור שחור או כהה.

כמו כן, חלמון ביצה מספק את מצעים ראיות נוכחות של lcithinase אנזים lipase. ס 'אאורוס זה lecithinase חיובי ולכן הילה ברורה יהיה שנצפתה סביב המושבה, המציין כי lecithin היה הידרוליזה.

במובן זה, את המראה של אגר זה של מושבות אפורות שחורות או כהות בהירים עם הילה אור סביב מצביעים על נוכחות ס 'אאורוס. 

אם אזור המשקעים נוצר, זה מעיד על כך יש פעילות ליפאז. כמה זנים של ס 'אאורוס הם ליפאז חיובי ושאר שלילי.

במקרה ס 'אאורוס אם הליפאז הוא חיובי, אזור אטום ייראה סביב המושבה אפור שחור או כהה, ולאחר מכן הילה ברורה בשל הפעולה של lecithinase..

מושבות של חיידקים ס 'אאורוס מסוגל לגדול במדיום זה יפתח מושבות חסרות צבע או חום, ללא הילה מסביב.

מושבות שחור טיפוסי ניתן לצפות גם עם או ללא גבול צבע, אבל ללא הילה ברורה. מושבות אלה לא צריך לקחת בחשבון, הם אינם תואמים ס 'אאורוס.

הכנה

ביצה חלמון ביצה

קח ביצה עוף טרי, לשטוף אותו היטב ומניחים אותו 2 עד 3 שעות ב 70% אלכוהול. ואז, את הביצה נפתחת aseptically ואת לבן ביצה מופרדים בזהירות החלמון. לאחר מכן 50 מ"ל של החלמון נלקחים מעורבב עם 50 מ"ל של תמיסה פיזיולוגית סטרילית.

אשלגן Tellurite ב 1% w / v

כמה בתים מסחריים למכור 1% Tellurite אשלגן מוכן לשימוש. הוא הוסיף את המדיום לפני המדיום מתמצק.

כדי להכין פתרון זה במעבדה לשקול 1.0 גרם של tellurite אשלגן להתמוסס בחלק של מים. לאחר מכן כמות המים הושלמה 100 מ"ל. הפתרון חייב להיות מעוקר על ידי שיטת סינון.

הכנת בינוני תרבות

לשקול 60 גרם של המדיום מיובש להתמוסס 940 מ"ל של מים מזוקקים. השאירו את התערובת לנוח במשך כ 5 עד 10 דקות.

החל את החום על ידי ערבוב מדיום לעתים קרובות כדי לשפר את תהליך המסה. בואו להרתיח לרגע. לעקר החיטוי על 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות.

בואו לעמוד עד שזה מגיע לטמפרטורה של 45 מעלות צלזיוס ולהוסיף 50 מ"ל של תחליב חלמון ביצה ו 10 מ"ל של Tellurite 1%. מערבבים היטב ומגישים 15-20 מ"ל על צלחות פטרי סטריליות.

אפשר לחזק, להזמין הפוך in plaers ולאחסן במקרר עד לשימוש.

ה- pH הסופי של המדיום מוכן צריך להיות על 6.8 ± 0.2.

לפני שתילת מדגם, לחכות עד צלחת לוקח את הטמפרטורה הסביבה. לזרוע את הצלחות על ידי זרימה או על ידי זריעה על פני השטח עם מרית Drigalski.

צבעו של המדיום המיובש הוא שזוף בהיר צבע המדיום מוכן הוא ענבר בהיר.

השתמש

דוגמאות קליניות

דגימות קליניות הם seeded ישירות על ידי פריקת חלק מהחומר בקצה אחד של הצלחת, ומשם זה מתפשט על ידי תשישות. דגירה של 24 עד 48 שעות ב 35-37 מעלות צלזיוס.

דגימות מזון

לשקול 10 גרם של מדגם מזון homogenize ב 90 מ"ל של 0.1% peptonated מים, דילולים מוכנים משם, במידת הצורך. לחסן את הצלחות בשלושה עותקים עם 0.3 מ"ל של פתרונות מוכנים, לזרוע על פני השטח עם מרית Drigalski. דגירה של 24 עד 48 שעות ב 35-37 מעלות צלזיוס.

מתודולוגיה זו מאפשרת לספור את המושבות טיפוסי המתקבל והוא אידיאלי כאשר הנוכחות של ס 'אאורוס מעל 10 CFU לכל גרם / מ"ל ​​מדגם.

אם אתה חושד כי כמות ס 'אאורוס זה קטן או יש הרבה צומח נלווה, הוא הציע להעשיר את המדגם בסויה טריפטיקאז מרק עם NaCl 10% ו 1% נתרן pyruvate. זה יעדיף את הצמיחה של ס 'אאורוס ותמנע את התפתחות הצומח הנלווית. צינורות כי הם מעונן יהיה seeded על אגר באירד פרקר.

דגימות מים

בשנת מערכת סינון אבק מעוקר 100 מ"ל של מים מסוננים תחת מחקר, ולאחר מכן קרום microporous של 0.4 מיקרון מוסר עם מלקחיים סטריליות להציב על צלחת ביירד פארקר. דגירה של 24 עד 48 שעות ב 35-37 ° C. טכניקה זו מאפשרת לספור מושבות אופייניות של ס 'אאורוס.

בקרת איכות

כדי להעריך את האיכות של אגר Baird פרקר, זנים ידוע ניתן להשתמש, כגון סטפילוקוקוס אאורוס ATCC 25923, סטפילוקוקוס אאורוס ATCC 6538, סטפילוקוקוס אפידרמידיס ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 או פרוטאוס מיראביליס ATCC 43071.

במקרה של זנים ס 'אאורוס ATCC ידועה להפחית Tellurite, והם lipase חיובית lecithinase. לכן חייבת להיות התפתחות משביעת רצון ולגדול מושבות קמור עם שחור מרכז קצה חסר צבע, עם הילה אטומה ועוד הילה יותר ברור חיצוני.

מאידך, ס האפידרמיס צפויה התפתחות ירודה במדיום הזה, עם מושבות שחורות-אפורות לשחורים, ללא הילה ברורה.

כדי E. coli ו פ. מיראביליס היא צפויה להיות מעוכבת לחלוטין או חלקית. במקרה של גידול, מושבות חומות יפתחו ללא אזור אטום, ולא הילה ברורה.

המלצות

-המדיום לא צריך להיות מחומם לאחר הוספת tellurite והחלמון.

-הכנת תחליב חלמון הביצה ותוספתו במדיום היא צעד פגיע מאוד של זיהום. טיפול אקסטרים חייב להילקח.

-אם יש נוכחות של מושבות אופייניות של ס 'אאורוס חייב להיות מאושש על ידי הרכבה של מבחן קואגולז על זן זה.

-אם יש תוצאות בספק עם coagulase, בדיקות אישור אחרות חייב להיות מותקן.

-להיזהר לא לבלבל את נוכחותם של מושבות טיפוסי של ס 'אאורוס עם מושבות לא טיפוסיות של צבע שחור.

הפניות

1. תורמים ויקיפדיה. ביירד-פרקר אגר. ויקיפדיה, האנציקלופדיה החופשית. 15 מרס 2017, 19:36 UTC. זמין ב: wikipedia.org / גישה 18 פבואר 2019.
2. מעבדות BD. ביירד פרקר אגר. 2006. זמין בכתובת: bd.com
3. מעבדות בריטניה. ביירד פארקר אגר בסיס. 2015. זמין ב: britanialab.com
4. מעבדות פרנסיסקו סוריה מלגיזו. 2009 ביירד פארקר אגר. זמין בכתובת: http://f-soria.es/Inform
5. מעבדות בריטניה. אשלגן טלוריט. 2015. זמין ב: britanialab.com
6. Alarcón-Lavín M, Oyarzo C, Escudero C, Cerda-Leal F, Valenzuela F. נשיאה סטפילוקוקוס אאורוס סוג אנטרוטוקסיגני A, במריחות של בלוטת התריס באוכל. .1 צ'ילה 2017; 145: 1559-1564
7. תקן ונצואלה Covenin 1292-89. (1989). מזון בידוד וספירה סטפילוקוקוס אאורוס. זמין ב:sencamer.gob.ve