אגר BHI יסוד, הכנה ושימושים



ה BHI אגר או המוח הלב אפר עירוי הוא בינוני תרבות מזין מוצק. בספרדית אנו מתייחסים אליו כמו אגר עירוי לב במוח. זהו מדיום תרבות הלא סלקטיבי, כלומר כל מיני חיידקים שליליים חיוביים גראם גראם יכולים לפתח, כמו גם כמה שמרים ועובש.

הוא מורכב בשר עירוי הלב המוח, hydrolyzate פפטי של רקמות חיות, hydrolyzate קזאין הלבלב, נתרן כלורי, גלוקוז, פוספט disodium ואת אגר.

יש לציין כי אגר BHI הוא אחד התקשורת התרבותית השכיחה ביותר במעבדות בקטריולוגיה. זה יכול לשמש ללא ספקים כתרבות העיקרית, תת תרבות של מושבות שהושגו בתקשורת סלקטיבית אחרים או לשמירה על זנים במעבדה.

מצד שני, הוא בינוני אידיאלי לשמש כבסיס בהכנת מדיה מועשר, כגון אגר דם אגר שוקולד. שניהם אידיאליים לבודד מיקרואורגניזמים תובעניים מנקודת מבט תזונתיים. עם זאת, יש לקחת בחשבון כי מאז הוא מכיל גלוקוז זה לא מספיק כדי לבחון את דפוסי המוליזה.

כמו כן, אגר BHI יכול לשמש להכנת אמצעים מיוחדים לבידוד של מיקרואורגניזמים פתוגניים של צמיחה קשה בתקשורת משותפת, ביניהם: המופילוס, פרנסיסלה טולרנזיס, Corynebacterium diphtheriae ו- Histoplasma capsulatum.

עם תוסף אנטיביוטי BHI אגר הופך בינוני סלקטיבי לבידוד של פטריות.

אינדקס

  • 1 קרן
  • 2 הכנה
    • 2.1 וודאות
    • 2.2 לוחות
    • 2.3 הכנת אגר דם
  • 3 שימושים
    • 3.1 שימוש ללא תוספי מזון
    • 3.2 כבסיס אגר להכנת מדיה אחרים
  • 4 בקרת איכות
  • 5 הפניות

קרן

זהו בינוני תרבות מזין לבודד מיקרואורגניזמים תובעניים מתון, להיות מסוגל להגדיל את העשרה שלה עם תוספת של דם ותוספי תזונה אחרים.

זהו בינוני תרבות לא סלקטיבי, ולכן הוא מאפשר את הצמיחה של רוב החיידקים החיוביים של גראם וגרם, כמו גם כמה פטריות. עם זאת, זה יכול להיות סלקטיבי עם תוספת של אנטיביוטיקה.

המדיום מכיל עירוי של המוח עגל הלב, פפטיד הידרוליזה מ רקמת בעלי חיים הידרוליזה casein הלבלב; כל התרכובות הללו משמשות כמקור לוויטמינים, חומצות אמינו, חנקן ופחמן.

גלוקוז הוא פחמימות המספקת אנרגיה למיקרואורגניזמים ברגע שהם התסיסו אותו. והואיל, נתרן כלורי ו פוספט דיסודיום לשמור על שיווי משקל אוסמוטי ולספק pH קרוב נייטרליות. לבסוף, אגר נותן את עקביות מוצק בינוני.

הכנה

לשקול 52 גרם של המדיום מיובש להתמוסס ליטר אחד של מים מזוקקים. מביאים את התערובת למקור חום עד שהיא רותחת, תוך ערבוב תכופות בתהליך המסה.

אתה יכול להכין טריזים או צלחות של אגר BHI ללא תוספים.

דפנות

להכנת הכנת פלחים לשרת למלא חץ צינור אחד, מכסה לעקר ב 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות, המתעוררים על מצע בסיס מוצק עד. לאחר מכן לאחסן במקרר עד לשימוש.

צלחות

התערובת מומס הוא autoclaved ב 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות, כאשר הוא משאיר את זה מותר להתקרר ל 50 מעלות צלזיוס ו 20 מ"ל של המדיום מוגשים בצלחות פטרי סטרילית. הם רשאים לגבש, להפוך ולאחסן במקרר עד שהם משמשים. אפשר צלחות לקחת טמפרטורת החדר לפני השתילה.

ה- pH של המדיום צריך להיות 7.4 ± 0.2.

המדיום הלא מוכן הוא בז 'ומוכן הוא ענבר בהיר.

הכנת אגר דם

לאחר חיטוי המדיום, קירור לטמפרטורה של כ -45 עד 50 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן להוסיף את הדם (50 מ"ל), לערבב בעדינות ומגישים כדי homogenize בסביבה נקייה מחיידקים 20 מ"ל בכל צלחת פטרי. אם בועות טופס על הצלחת, הלהבה של מבער צריך לעבור במהירות על הבועות כדי לחסל אותם.

כמו כן, מדיה מיוחדת ניתן להכין על ידי הוספת תוספים המתאימים כאשר התערובת מגיעה לטמפרטורה של 45 עד 50 מעלות צלזיוס.

המדיום הוא אדום דובדבן.

שימושים

השתמש ללא ספקים

BHI אגר ללא תוספים שימושי כתרבות העיקרית לשתילת זנים טהורים של מיקרואורגניזמים כי הם בינוניים או מתונים תובעני מאוחר יותר זיהוי.

כאמצעי צבע האור, הוא אידיאלי עבור צפייה פיגמנטים וגם אינו מכיל חומרים מפריעים ניתן לבצע עליו כמה בדיקות ביוכימיות כגון מונואמין ו catalase, או הר בדיקות ביוכימיות אחרות ממושבות מזה אגר.

כמו כן, BHI אגר wedges נמצאים בשימוש נרחב עבור תחזוקה של זנים עבור זמן נחוש במעבדה (bacterioteca).

צלחות או טריזים נטועים על פני השטח עם זנים חיידקים מודגרת על 37 מעלות צלזיוס למשך 24 עד 48 שעות. בעוד, ב פטריות הטמפרטורה ואת הדגירה זמן יהיה תלוי בסוג של פטרייה כי הוא ביקש.

כבסיס אגר להכנת מדיה אחרים

עם בסיס זה ניתן להכין מועשר מדיה סלקטיבית.

מועשר

תפקידה העיקרי הוא לשמש בסיס בהכנת אגר דם לשימוש שגרתי במעבדות מיקרוביולוגיה. במיוחד, הבסיס BHI הוא תורם לבידוד של זנים של סטרפטוקוקוס. עם זאת, יש לו את החיסרון של לא מתאים להתבוננות דפוסי המוליזה כי זה מכיל גלוקוז.

זה משמש גם בהכנת ארנב או ארנב דם סוס לבידוד של המופילוס. לקבלת תוצאות טובות יותר אתה יכול להוסיף תוספת העשרה (IsoVitaleX).

אם הדגימות מגיעות ממערכת הנשימה אל האגר, ניתן להוסיף את bacitracin כדי לעכב את הצומח הנלווה ולהגדיל את ההסתברות להתאוששות של זנים של המופילוס.

מצד שני, אגר דם (כבש או אדם) ניתן להכין עם ציסטין tellurite לבודד Corynebacterium diphtheriae. כמו כן, כדאי להכין אגר דם ארנב, עם תוספת של ציסטין גלוקוז לבידוד של פרנסיסלה טולרנסיס.

זריעת של לוחות אגר דם נעשה על ידי תשישות מודגרת ב 35-37 מעלות צלזיוס למשך 24-48 שעות microaerophilic (5-10% CO)2).

סלקטיבי

זה בינוני עם תוספת של אנטיביוטיקה יכול להחליף אגר Sabouraud לבידוד של פטריות.

השילוב של אגר BHI עם chloramphenicol - גנטמיצין או פניצילין,, סטרפטומיצין ודם סוס אידיאלי לבידוד של Histoplasma capsulatum.

בהתאם מיקרואורגניזם להיות מבודד, הדגירה ב 35-37 מעלות צלזיוס או בטמפרטורת החדר ב Aerobiosis מומלץ. לפעמים הדגירה נחוצה בשני טווחי הטמפרטורה, באמצעות 2 צלחות בשביל זה.

כמה פטריות כמו טריגופיטון הם צריכים להיות מודגרות בטמפרטורת החדר למשך עד 7 ימים.

בקרת איכות

מכל אצווה מוכן מומלץ לדגור 1 צלחת או טריז על 37 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות ולוודא כי אין צמיחה; חשוב במיוחד כאשר מכינים אגר דם, כי זה בינוני מזוהם בקלות.

מצד שני, איכות המדיום ניתן להעריך על ידי inoculating זנים סטנדרטיים ידוע או מוסמך התבוננות הפיתוח שלהם.

במובן זה, כדי להעריך את אגר BHI ללא תוספים, זנים של Escherichia coli ATCC 25922, סטפילוקוקוס אאורוס ATCC 25923 או קנדידה אלביקנים ATCC 10231. הם מודגרת על 37 מעלות צלזיוס ב Aerobiosis עבור 24 עד 48 שעות. בכל המקרים צפוי גידול משביע רצון.

כדי להעריך את צלחות אגר הדם, זנים של  סטרפטוקוקוס פיוגנים ATCC 19615, סטרפטוקוקוס דלקת ריאות ATCC 6305 או Trichophyton mtagrophytes ATCC 9533.

זנים חיידקיים מודגרת על 37 מעלות צלזיוס ב microaerophilicus במשך 24 שעות, בעוד הפטרייה מודגרת בטמפרטורת החדר בחדר לח עד 7 ימים. בכל המקרים צפוי גידול משביע רצון.

הפניות

  1. מעבדות בריטניה. המוח הלב עירוי Agar. 2015. זמין ב: britanialab.com.
  2. מעבדות BD המוח הלב עירוי (BHI) אגר. 2013. זמין בכתובת: bd.com.
  3. דיקו פרנסיסקו סוריה מלגיזו מעבדות, ש. המוח הלב עירוי אגר. 2009.
  4. מעבדה Neogen. המוח הלב עירוי אגר. זמין ב: foodsafety.neogen.com
  5. גיל מ. אגר דם: יסוד, שימושים והכנה. 2018. זמין ב: lifeder.com.
  6. תורמים ויקיפדיה. עירוי לב במוח ויקיפדיה, האנציקלופדיה החופשית. 19 בספטמבר 2018, 03:58 UTC. זמין ב: wikipedia.org. גישה אל 2 במרץ 2019.
  7. פורבס ב ', סחם ד', וייסנפלד א. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי & סקוט. 12 ed. עריכה Panamericana S.A. ארגנטינה.