בדיקות ביוכימיות סוגי, מה הם וחשיבות

ה בדיקות ביוכימיות במיקרוביולוגיה הם קבוצה של בדיקות כימיות המתבצעות על מיקרואורגניזמים הנוכחים במדגם כדי לזהות אותם; מיקרואורגניזמים אלה הם בדרך כלל חיידקים. יש מספר גדול של בדיקות ביוכימיות לרשות מיקרוביולוג.

עם זאת, הבחירה של בדיקות אלה מבוססת על ממצאים ראשוניים, כגון דפוס גראם דפוס ודמויות הצמיחה, המאפשרים את החיידקים להיות מוקצה לקטגוריה מסוימת. בדיקות ביוכימיות מבוססות בעיקר על תכונות מטבוליות של כל סוג של חיידקים. 

לא כל החיידקים יש את אותם מאפיינים, ולכן הוא נחקר אם יש להם אנזים מסוים על ידי הוספת המצע ומחכה התגובה להתרחש. בדרך כלל נחישות זו ניתנת על ידי שינוי של צבע או pH במדיום התרבות.

פחות מ -15 בדיקות ביוכימיות נדרשות לעיתים קרובות לזיהוי אמין של חיידק עד לרמה המינית. ביצוע בדיקות ביוכימיות יותר יכול להגביר את האמון בזיהוי.

רוב הבדיקות הביוכימיות הללו מבוצעות בסרום או בדם פלסמה. עם זאת, הם יכולים גם להתבצע הפרשות ביולוגיות אחרות כגון שתן, נוזל מוחי, נוזל pleural ו שרפרף, בין היתר..

אינדקס

• / קפה
  • 1.1 אוניברסלי
  • 1.2 הפרשים
  • 1.3 ספציפיות
• סוגי בדיקות ביוכימיות
  • 2.1 בדיקת קטלאז
  • 2.2 בדיקת oxidase
  • 2.3 בדיקת מאלטול אגר (MSA)
  • 2.4 בדיקת קואגולז
  • 2.5 בדיקת האוראז
• 3 מהם הבדיקות הביוכימיות??
• 4 חשיבות
• 5 הפניות

קפה

בדיקות ביוכימיות ניתן לסווג לשלוש קבוצות:

יוניברסל

אלה הם המבחנים שניתן לבצע על כל מדגם וכי מנחים את המיקרוביולוגיה על הבדיקות הביוכימיות הבאות שיש לבצע על מנת להשיג זיהוי אמין..

דוגמה

בדיקת קטליז ו אוקסידאז.

הבדלים

אלה הם המבחנים המתבצעים כדי לזהות את מיקרואורגניזמים הנוכחי המדגם עד לרמה המינים.

הזיהוי מתבסס על תוצאות שילוב של בדיקות, מאחר והתוצאות האינדיבידואליות אינן אינפורמטיביות מספיק כדי להפוך את הזיהוי.

דוגמה

בדיקות IMViC ומבחני ניצול סוכר.

ספציפי

הם בדיקות ספציפיות עבור קבוצה מסוימת של מינים או תת מין. בדיקות אלה נעשות בדרך כלל על מנת לאשר או לזהות ברמה תת מינית. בדיקות אישיות הן אינפורמטיביות בפני עצמן.

דוגמה

מבחן γ-Glutamyl aminopeptidase.

סוגי בדיקות ביוכימיות

מבחן קטלאז

מבחן קטליז הוא מבחן כדי להדגים את נוכחותו של האנזים catalase ידי הפירוק מי חמצן לתוך חמצן ומים. כמות קטנה של חיידקים מתווסף לירידה של מי חמצן (3%) בשקופית.

מבחן קטלאז הוא מבחן פשוט המשמש את מיקרוביולוגים כדי לסייע לזהות מינים חיידקים כדי לקבוע את היכולת של כמה חיידקים לשבור מי חמצן על ידי הפקת אנזים catalase.

אם בועות חמצן נצפות, זה אומר כי החיידק בעל האנזים catalase, כי זה מזרז את הפירוק של מי חמצן לתוך חמצן ומים. הוא אמר אז כי האורגניזם הוא חיובי catalase (למשל: סטפילוקוקוס אאורוס).

בדיקת oxidase

בדיקה זו משמשת לזיהוי מיקרואורגניזמים המכילים את האנזים ציטוכרום אוקסידאז (חשוב בשרשרת התחבורה האלקטרונית). זה נפוץ להבחין בין משפחות Enterobacteriaceae ו Pseudomadaceae.

Cytochrome oxidase מעביר אלקטרונים מרשת ההובלה האלקטרונית לחמצן (מקדם האלקטרון הסופי) ומפחית אותו למים. בדיקות Oxidase לספק אלקטרונית אלקטרונית התורם ו acceptor מולקולות.

כאשר התורם אלקטרון מתחמצן על ידי פעולה של ציטוכרום אוקסידאז, המדיום הופך סגול כהה ונחשב תוצאה חיובית. מיקרואורגניזם Pseudomonas aeruginosa הוא דוגמה לחיידק oxidase חיובי.

ניסוי מלח מאניטול (MSA)

סוג זה של הבדיקה הוא גם סלקטיבי וגם דיפרנציאלי. ה- MSA יבחר אורגניזמים המסוגלים לחיות בסביבות עם ריכוז גבוה של מלח, כגון מינים של סטפילוקוקוס בניגוד למינים של סטרפטוקוקוס, אשר הצמיחה שלה מעוכבת בתנאים אלה.

רכיב ההפרש במבחן זה הוא סוכר manititol. אורגניזמים המסוגלים להשתמש במניטול כמקור מזון יפיקו תוצרי לוואי של תסיסה, שהם חומציים ולכן ירדו את ה- pH של המדיום.

חומציות של המדיום גורם מחוון pH, פנול אדום, כדי להפוך צהוב. דוגמאות למינים של חיידקים שניתן להבדיל ביניהם בשיטה זו הם: סטפילוקוקוס אאורוס (חיובי כי זה תסיסה mannitol) ו סטפילוקוקוס אפידרמידיס (שלילי בגלל מניטול לא תסיסה).

בדיקת קואגולז

Coagulase הוא אנזים המסייע קרישת דם פלזמה. בדיקה זו מבוצעת על חיידקים חיוביים חיוביים וחיידקים חיוביים לזיהוי סטפילוקוקוס אאורוס (coagulase חיובי) למעשה, coagulase הוא גורם ארסיות של מין חיידקי זה.

היווצרות של קרישי דם סביב זיהום הנגרם על ידי חיידק זה כנראה מגן עליו מפני phagocytosis. בדיקה זו שימושית מאוד כאשר אתה רוצה להבחין בין סטפילוקוקוס אאורוס של מינים אחרים של סטפילוקוקוס אשר קריש שלילי.

בדיקת האוראז

בדיקה זו משמשת לזיהוי חיידקים המסוגלים להפחתת אוריאה, תוך שימוש באוריזה האנזימית. זה נפוץ להבחין בין המינים פרוטאוס של חיידקים אנטריים אחרים.

הידרוליזה של אוריאה מייצרת אמוניה כאחת ממוצריה. בסיס חלש זה מגדיל את ה- pH של המדיום מעל 8.4 ואת מחוון pH (פנול אדום) משתנה מ צהוב ורוד. דוגמה של חיידק אוריאזי חיובי הוא פרוטאוס מיראביליס.

מהם הבדיקות הביוכימיות??

בדיקות ביוכימיות במיקרוביולוגיה משמשות לאבחון מחלות הנגרמות על ידי חיידקים ולנטר את הטיפולים המופקדים על מנת להילחם בהם. בנוסף, הם משמשים להקרנה של מחלות זיהומיות ועל הפרוגנוזה שלהם..

הזיהוי הביוכימי של מיקרואורגניזמים מציע מושג על מה מיקרואורגניזמים אלה מסוגלים לעשות, להיות אפשרי את ההפליה של זנים שונים של אותו מין על ידי פרופילים ביוכימיים ספציפיים.

הבדלים בפעילויות אנזימטיות ספציפיות מודיעים על האקולוגיה, הפיזיולוגיה או הסביבה הטבעית של המיקרואורגניזם, אשר במקרים מסוימים יכולים להיחשב למידע חשוב.

משמעות

ההבדלים המבניים מבחינת הצורה, הגודל וההשפעה של החיידקים עוזרים מעט מאוד בתהליך הזיהוי, מכיוון שישנם סוגים רבים של חיידקים בעלי צורה, גודל ומיקום דומים.

מסיבה זו, בסופו של דבר זיהוי החיידקים מבוסס בעיקר על ההבדלים בפעילות הביוכימית שלהם.

לכל מינים של חיידקים יש קבוצה מוגדרת היטב של פעילויות מטבוליות שונות מכל המינים האחרים. אלה "טביעות אצבע" ביוכימיים הם נכסים בשליטת אנזימים חיידקיים.

לפיכך, בדיקות ביוכימיות חשובות משום שהן מסייעות לחוקר לזהות נכונה את הפתוגנים הנמצאים במדגם ובכך, בדרך זו, להיות מסוגלים להמליץ ​​על הטיפול המתאים לחולה..

הפניות

1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). ביוכימיה קלינית (8th ed.). ויילי - בלקוול.
2. קלארק, פ 'ה', & קוואן, ס 'ט (1952). שיטות ביוכימיות לבקטריולוגיה. כתב העת של מיקרוביולוגיה כללית, 6(1952), 187-1977.
3. G, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). ביוכימיה קלינית (מהד 'ה -5). Elsevier מדעי הבריאות.
4. גולדמן, א 'וגרין, ל' (2008). מדריך מעשי של מיקרוביולוגיה (מהדורה שנייה). לחץ על CRC.
5. Harrigan, W. (1998). שיטות מעבדה במיקרוביולוגיה של מזון (מהדורה שלישית). אקדמיה.
6. Vasanthakumari, R. (2009). מיקרוביולוגיה מעשית. פרסומים BI בע"מ.