בסיס מים פפטון, הכנה ושימושים

ה מים פפטונדה זהו אמצעי העשרה לא סלקטיבי, המשמש בעיקר כמדלול לדגימות מזון או לחומרים אחרים. משמעות הדבר היא כי מנקודת מבט כימית היא פשוטה מאוד, מכיל פפטון של בשר, נתרן כלורי ומים.

יש לו ערך תזונתי מסוים, המאפשר להעשיר את המדגם. אם יש חיידקים מוכים זה אומר יש את הכוח לתקן את הכדאיות. זה שימושי במיוחד בהתאוששות של חיידקים השייכים Enterobacteriaceae המשפחה.

במקרה של ההתאוששות של סלמונלאס, מומלץ להשתמש בחלופת מים פפטונדה שנאגרו; זה משמש כאמצעי להעשרה מראש של המדגם, במקרה זה הוא מכיל אלמנטים אחרים כגון פוספט דיסודיום ו dipotassium פוספט.

בדרך כלל מים peptone מוכן ב- pH נייטרלי, אולם גרסאות אחרות במידת הצורך את ה- pH הוא 8.5 ± 0.2 (אלקליין), כי החיידק נועד לבודד alkalophilic, כגון ויבריו כולרה.

מצד שני, מדיום זה יכול לשמש מדיום בסיס בדיקות פחמימות תסיסה.

אינדקס

• 1 קרן
• 2 הכנה
  • 2.1 הכנת בית (לא מסחרי)
  • 2.2 הכנה באמצעות מדיום מסחרי
  • 2.3 הכנה לבדיקות תסיסה
  • 2.4 גרסאות אחרות של מי פפטונדה
• 3 השתמש
  • 3.1 דגימות צואה
  • 3.2 דגימות מזון
• 4 בקרת איכות
• 5 מגבלות
• 6 הפניות

קרן

Peptones לספק את החומרים המזינים הנדרשים לפיתוח חיידקי, בעיקר חנקן וחומצות אמיניות שרשרת קצר, בעוד נתרן כלורי שומרת על איזון אוסמוטי.

בנוסף, המדיום מאפשר לפזר, homogenize ולתקן תאים חיידקיים שנפגעו על ידי תהליכים תעשייתיים..

כמו מדלל זה אידיאלי, יעיל להחליף את הפתרון הפיזיולוגי (SSF) או חיץ פוספט (PBS).

הצמיחה הבקטריאלית מתבטאת בהתבוננות בעכירות.

הכנה

הכנה תוצרת בית (לא מסחרי)

לשקול 1 גרם של פפטון ו 8.5 גרם של נתרן כלורי, להתמוסס 1 ליטר של מים מזוקקים. PH צריך להיות מותאם 7.0. בשביל זה אתה יכול להשתמש 1 כלור נתרן N.

הכנה באמצעות מדיום מסחרי

שוקלים 15 גרם של המדיום מיובש להתמוסס ליטר אחד של מים מזוקקים. Homogenize את התערובת. אם יש צורך, תערובת מבושל במשך 1 דקות כדי לסייע פירוק מוחלט. לשרת ב 100 צלוחיות מ"ל או צינורות 10 מ"ל לפי הצורך. החיטוי על 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות.

מגניב להשתמש או לאחסן במקרר. ה- pH הסופי של המדיום הוא 7.2 ± 0.2.

צבעו של המדיום המיובש הוא בז 'בהיר ומוכן הוא ענבר בהיר.

הכנה לבדיקות תסיסה

הכנת מעל -before להיות מעוקר יש להוסיף פחמימה לריכוז סופי של 1%, יותר אינדיקטור אנדרדה (fuchsin חומצה) או פנול אדום (0.018 g / L). כדי הצינורות היו להציב פעמון דורהאם עבור התבוננות היווצרות גז.

עוד גרסאות מים פפטונדה

-מים פפטון שנאגרו או שנאגרו

זה מכיל hydrolyzate אנזימטי קזאין, נתרן כלורי, פוספט dihydrogen אשלגן ונתרן dodecahydrate פוספט מימן. ה- pH הסופי הוא 7.0 ± 0.2.

להכנת שלה, לשקול 20 גרם של המדיום מיובש להתמוסס 1 ליטר מים מזוקקים. תנו לעמוד במשך 5 דקות בערך. מחממים דקה אחת עד להמסה מלאה.

יוצקים לתוך בקבוקים מתאימים לפי הצורך. לעקר באמצעות החיטוי על 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות.

-מים פפטוניים אלקליים

לשקול 25 גרם של המדיום מיובש להתמוסס 1 ליטר מים. המשך כמתואר למעלה. ה- pH נע בין 8.3 ל -8.7.

השתמש

את inoculum נעשה על ידי הנחת מדגם ישירות.

הוא משמש כדי לדלל את הדגימות, במיוחד כאשר הוא חשד כי ייתכן פגום חיידקים. בדרך כלל הדילולים הם 1:10 ו- 1: 100.

דגירה במשך 24 שעות ב Aerobiosis ב 35-37 מעלות צלזיוס.

דגימות צואה

עבור דגימות צואה מחפש סלמונלה, מומלץ להשתמש במים שנאגרו או שנאגרו כאמצעי העשרה קדם-מעשית..

לשם כך, בצע את הפעולות הבאות:

אם הצואה נוצר, לקחת 1 גרם של המדגם. אם הם נוזליים, לקחת 1 מ"ל של שרפרף ו להשעות בצינור עם 10 מ"ל של מים peptonated שנאגרו. במקרה של ספקטלים רקטלים, פריקה את החומר הכלול ספוגית לתוך הצינור עם מים peptonated שנאגרו.

בכל המקרים, לערבב homogenize המדגם טוב מאוד.

לדגור על 37 מעלות צלזיוס במשך 18-24 שעות. לאחר מכן תת לטפח במרק העשרה כגון מרק cystenite ציסטין או מרק tetrathionate ב 37 מעלות צלזיוס במשך 18-24 שעות. לבסוף לטפח בתקשורת סלקטיבית עבור סלמונלה, כגון אגר SS, אגר XLD, אקט hektoen, בין היתר.

דגימות מזון

מי peptone משמשים כמדיום העשרה או כפי diluent פשוט, אבל אם מיני סלמונלה נערכים חיפושים משמשים-העשרה מראש, כפי שתוארו לעיל.

במזונות להמשיך כדלקמן:

עבור מזון מוצק לשקול 25 גרם של המדגם עבור מזונות נוזליים למדוד 25 מ"ל של זה. מקום אמר חלק בצלוחיות המכילות 225 מ"ל של מים peptonated. מערבבים ו homogenize המדגם.

אם הוא חשוד כי עומס מיקרוביאלי הוא גבוה יכול להתבצע דילולים סדרתי עשרוני או כדי להקל על ספירת יחידות המושבה להרכיב (CFU).

מספר הדילולים יהיה תלוי בסוג המדגם ובניסיון האנליטי.

אם להיפך הוא חשד כי עומס מיקרוביאלי הוא נמוך מאוד, אין צורך לעשות דילולים. לאחר מכן, תת-קרקע במדיה סלקטיבית.

במקרה של מזון מן הים, כגון פירות ים, דגים, בין היתר, בחיפוש אחר ויבריו כולרה או מינים אחרים Vibrio, מים פפטון מותאם ל pH 8.5 (מים peptated אלקליין) יש להשתמש.

בקרת איכות

מכל אצווה מוכן, אחד לשני צינורות צריך להיות מודגרות ללא חיסון במשך 24 שעות ב Aerobiosis ב 37 ° C. בסופו של דבר, אין עכירות או שינוי צבע יש לראות.

כמו כן, זנים שליטה ידועים ניתן להשתמש כדי להעריך את האפקטיביות שלהם:

לשם כך, ניתן להשתמש בזנים החיידקיים הבאים: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, סטפילוקוקוס אאורוס ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, סלמונלה טיפימוריום ATCC 1428, סלמונלה אנטריטידיס ATCC 13076.

בכל המקרים צפויה התפתחות מיקרוביאלית משביעת רצון, שנצפית על ידי העכירות של המדיום.

מגבלות

-המדידה המיובשת מאוד היגרוסקופית, ולכן יש להרחיק אותה מלחות.

-המדיום לא אמור לשמש אם סוג כלשהו של הידרדרות הוא ציין.

-המדיום תרבות מיובש צריך להיות מאוחסן בין 10 - 35 ° C

-המדיום מוכן צריך להישמר בקירור (2-8 מעלות צלזיוס).

הפניות

1. קמאצ'ו A, ג'יילס M, Ortegón A, Palao M, סראנו B וטכניקות O. ולאסקז עבור ניתוח מזון מיקרוביולוגי. 2009, 2nd ed. הפקולטה לכימיה, UNAM. מקסיקו מדריכים Manager גרסה ומסמכים (AmyD) של הפקולטה לכימיה, UNAM 1. זמין בכתובת: http://depa.fquim.unam.mx
2. מעבדות בריטניה. מים פפטונדה שנאגרו. 2015. זמין ב: britanialab.com
3. מעבדות Neogen מים פפטוניים. זמין ב: foodsafety.neogen.com
4. מעבדות בריטניה. מים פפטוניים. 2015. זמין ב: britanialab.com
5. מעבדות Merck מים פפטוניים שנאגרו. זמין ב: merckmillipore.com
6. מעבדות קונדה פרונאדיסה. מים פפטוניים אלקליים. זמין ב: condalab.com
7. פורבס ב ', סחם ד', וייסנפלד א. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי & סקוט. 12 ed. עריכה Panamericana S.A. ארגנטינה.