אגר סלמונלה - שיגלה יסוד, הכנה ושימושים
ה סלמונלה - שיגלה אגר הידוע גם בשם אגר SS, הוא בינוני סלקטיבי בינוני דיפרנציאלי, שתוכנן במיוחד לבידוד של חיידקים enteropathogenic של הגנרל סלמונלה ו Shigella, משני דגימות סביבתיות קליניים..
לאגר הס"ס יש קומפוזיציה מורכבת. זה מורכב תמצית בשר, פפטון, לקטוז, מלחים מרה, סודיום ציטרט, thiosulfate נתרן, סיגריות ferric, אגר, אדום נייטרלי, ירוק בהיר מים מזוקקים. בהתחשב סלקטיביות רבה שלה, אפשר לשתול דגימות עם צמחייה מעורבת שופע.
במעבדות המיקרוביולוגיה נעשה שימוש נרחב במדיום סלמונלה-שיגלה כדי לחקור את נוכחותם של סלמונלה ושיגלה בדגימות של צואת שלשולים, ביוב, מי שתייה ומזון.
לפעמים יש צורך להשתמש מראש העשרה מרקים (מרק לקטוז) והעשרה (מרק celenite ציסטין) לשחזר זנים סלמונלה.
צעדים אלה נדרשים כאשר קיומו של סלמונלה חשוד בכמויות נמוכות מאוד, או כאשר המתח עלול להיות מטופל על ידי תהליכים אופייניים לייצור התעשייתי, בעיקר מזון מעובד. כמו כן מומלץ להעשיר דגימות צואה מחולים שטופלו באנטיביוטיקה.
לאחר מכן, מרק מועשר יכול להיות seeded על אגר סלמונלה- Shigella מדיה דומים אחרים, כגון אגר xylose, deoxysiloxane ליזין (XLD) ו אקטיק hektoen אגר (HE).
אינדקס
- 1 קרן
- 1.1 הספק תזונתי
- 1.2 עקביות
- 1.3 סלקטיבי
- 1.4 הפרשי
- 2 הכנה
- 3 השתמש
- 4 מגבלות
- 5 בקרת איכות
- 6 הפניות
קרן
כל רכיב של המדיום תרבות סלמונלה- Shigella יש פונקציה מסוימת, ואת התערובת כולה מעניקה לו את המאפיינים המאפיינים אותו.
כוח מזין
תמצית הבשר ופפטון (קזאין מעוכל וריקמת בעלי חיים) מספקים את החומרים המזינים הדרושים (ניטרוגנים, פחמן וויטמינים) לפיתוח מיקרו-אורגניזמים המסוגלים לסבול את שאר הרכיבים.
עקביות
אגר אגר אחראי על מתן עקביות מוצקה למדיום.
סלקטיבי
המדיום הזה הוא מאוד סלקטיבי כי הוא מכיל מלחי מרה, סודיום ציטראט וירוק בהיר. לכן, היא מעכבת את הצמיחה של כל החיידק החיידקי החיובי, ורוב החיידקים השליליים של הגראם, כולל כמה קוליפורמים.
בעוד חיידקים של סלמונלה סוג וכמה זנים של Shigella לעשות תמיכה אלה compounds.
בעיקר, סוג סלמונלה עמיד מאוד למלחי מרה, עד כדי כך שהם מסוגלים לחיות בכיס המרה של כמה מטופלים המנסים לגרש את החיידקים דרך הצואה.
דיפרנציאלי
לקטוז הוא הפחמימות התוססת המסייעת להבדיל בין זני התסיסה הלקטוזיים לבין הזנים שאינם מתסיסים. מאפיין זה ניכרת על ידי נוכחות של מחוון pH, אשר במדיום זה הוא פנול אדום.
זנים תוססים לקטוז לתת מושבות אדומות, בעוד זנים שאינם תוססים חסרי צבע. מאפיין זה חשוב, שכן סלמונלה ו Shigella לא תסיסה לקטוז.
מצד שני, המדיום הזה מכיל thiosulfate נתרן כמקור של גופרית ציטריט ferric כמקור של ברזל. שני המרכיבים מסוגלים להבדיל את החיידקים המסוגלים לייצר מימן גופרתי. אלה מגיבים כדי ליצור משקע שחור של מסיס גופרית מסיס גלוי.
זה נכס יש כמה זנים של סלמונלה סוג. בדרך כלל המושבות שלהם הם שטוחים ללא צבע עם נקודה שחורה במרכזו. את שאר Salmonellas לא לייצר H2S ולהתפתח מושבות חסרות צבע.
מצד שני, מושבות של סוג Shigella הם שטוח חסר צבע ללא השחרה.
הכנה
משמעות הדבר היא פשוטה מאוד להכין.
לשקול 63 גרם של המדיום מסחרי מיובש להתמוסס ליטר אחד של מים מזוקקים. מחממים את הפתרון ומערבבים. התערובת יכולה להגיע לרתיחה במשך דקות.
המדיום הזה לא צריך החיטוי. לאחר התמוססותו הוא מוגש ישירות על צלחות סטריליות בודדות או כפולות.
כאשר התמצקות, הם מסודרים בצורה הפוכה של מקבלי רובד מאוחסנים במקרר (2-8 מעלות צלזיוס) עד שהם משמשים.
המדיום לאחר ההכנה צריך להיות pH 7.2 ± 0.2 ו כתום אדום.
חשוב לאפשר את לוחות להיות מזג לפני זריעת דגימות. אתה יכול ישירות הזרע המדגם המקורי, פריקה חומר על חלק של אגר ולאחר מכן משם לסטות על ידי תשישות.
במקרה של שימוש במרקים מועשרים, להעביר חלק מרק סלניט לזרוע עם מרית drigalski.
דגירה על 37 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות ב Aerobiosis.
יש לזכור כי כמות גרם לשקול את ה- pH הסופי של המדיום יכול להשתנות בין בית מסחרי אחד למשנהו. לוח הבסיס של המדיום תמיד מביא את האינדיקציות להכנתו.
השתמש
הוא משמש לעתים קרובות בניתוח תרבויות צואה במחקר המיקרוביולוגי של דגימות מים שיורית, מי שתייה ומזון.
לעתים קרובות צלחות כפולות מוכנים, בצד אחד אגר Salmonella- Shigella ממוקם בצד השני אגר XLD.
מגבלות
-זנים מסוימים של Shigella לא לגדול במדיום זה. לכן, זה לא מומלץ לבידוד העיקרי של הסוג הזה.
-לא כל מושבה צלולה עם מרכז שחור מעידה על סלמונלה; בדיקות ביוכימיות חייבות להתבצע כדי לזהות נכון, שכן המושבות של כמה זנים של פרוטאוס אינם נבדלים מאלו של סלמונלה.
-המדיום המיובש צריך להיות זהיר של חשיפה לסביבה, כפי שהוא מאוד hygroscopic. לכן, זה חייב להישמר בסביבה יבשה וסגורה היטב. פתח לתקופות קצרות מאוד.
-עם הזמן מלחי מרה יכול להאיץ, יצירת תמונה דומה mated בתוך אגר, אבל זה לא משפיע על התוצאות.
-כמה זנים של שיגלה יכולים לאט לקצר לקטוז.
בקרת איכות
כדי להוכיח כי המדיום פועל כראוי, מומלץ לשתול זנים בקרה ידועים או מאושרים ולבחון אם הצמיחה עונה על המאפיינים הצפויים.
לשם כך, זנים של E. coli, Enterobacter sp, קלבסילה pneumoniae, Shigella flexneri, סלמונלה typhimurium o אנטוקוקוס פקאליס.
התוצאות הצפויות הן:
Escherichia coli --מושבות קמורות ורודות.
Enterobacter ו Klebsiella- מושבות גדולות ורוד אדום או ורוד.
שיגלה --מושבות שטוחות או חסרות צבע.
סלמונלה טיפימוריום - מושבות חסרות צבע עם מרכז שחור.
אנטוקוקוס פקאליס-- עיכוב מוחלט.
הפניות
- דיקו פרנסיסקו סוריה מעבדות מלגיזו. סלמונלה - שיגלה אגר. 2009. זמין ב: f-soria.es
- מעב. BD סלמונלה - שיגלה אגר. 2013. זמין בכתובת: bd.com
- מעבדות בריטניה. סלמונלה - שיגלה אגר. 2015. זמין ב: britanialab.com
- ואלטק. סלמונלה-שיגלה אגר (אס"ר). זמין ב: andinamedica.com
- פורבס ב ', סחם ד', וייסנפלד א. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי & סקוט. 12 ed. עריכה Panamericana S.A. ארגנטינה.
- Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Win W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. מהדורה חמישית. עריכה Panamericana S.A. ארגנטינה.