אגר בסיס שוקולד, שימושים והכנה

ה אגר שוקולד זה בינוני מוצק, מועשר, לא סלקטיבי ולא דיפרנציאלי תרבות. הוא משמש בעיקר לבידוד של מיקרואורגניזמים בדרישה מנקודת מבט תזונתי, למרות שזה יכול לגדול כל סוג של חיידקים.

זו הסיבה התועלת שלה עולה במיוחד זריעת דגימות כי הם בדרך כלל סטרילית, כגון CSF ונוזל משותף. למרות שזה נכלל גם את האמצעים שנבחרו לזריעה דגימות פולימבריאלית, אך במקרים אלה יש צורך להוסיף אנטיביוטיקה כי לעכב את הצומח במקביל.

בינוני זה בעל צבע חום אופייני דומה מאוד לשוקולד, ומכאן שמו. ההכנה דומה מאוד אגר דם, רק במקרה זה הדם חייב להיות מחומם על מנת כי כדוריות הדם האדומות להישבר.

ההכנה שלו, כמו אגר דם, הוא עדין מאוד, שכן הוא מזוהם בקלות. מסיבה זו מעבדות רבות מעדיפות לרכוש בינוני זה כבר מוכן על ידי בתים מסחריים המבטיחים את איכותם.

אינדקס

• 1 קרן
• 2 שימושים
  • 2.1 אגר שוקולד מוכן עם אגר קולומביה
  • 2.2 אגר שוקולד מוכן עם אגר בסיס GC (עבור gonococci)
  • 2.3 אגר שוקולד מוכן עם אולר Müeller Hinton
  • 2.4 אגר שוקולד מוכן עם אגר Thay מרטין
• 3 הכנה
  • 3.1 חישובים
  • 3.2 לשקול ולפזר
  • 3.3 לעקר
  • 3.4 צבירת דם
  • 3.5 דרך נוספת להכנת אגר שוקולד ללא שימוש בדם
• 4 בקרת איכות
• 5 הפניות

קרן

בינוני זה מורכב בסיס אגר עשיר בחומרים מזינים דם מחומם. המוליזה של תאי הדם האדומים מספקת את הגורם X (המימין) ואת הגורם V (NAD), הנחוצים לצמיחת מספר מיקרואורגניזמים, כגון הסוג. המופילוס. זה גם מאוד שימושי לבידוד של Neisserias sp.

כמו אגר דם, מדיה שונים יכולים לשמש אגר בסיס בהתאם לצורך. בין התקשורת המשמשים הם עירוי לב במוח ואגר טריפטיקאז סויה, למרות המומלץ ביותר הם אגר קולומביה, Müeller הינטון, אגר GC אגר Thay מרטין..

כמה גרסאות של אגר שוקולד כוללים תוסף מועשר זמין מסחרית בשם Isovitalex או Polivitex.

תוספים אלו מכילים ויטמין B₁₂, L- גלוטמין, אדנין, גואנין הידרוכלוריד, p-aminobenzoic חומצה, dinucleotide אדנין nicotinamide (NAD), פירופוספט תיאמין, חנקתי וברזל, הידרוכלוריד תיאמין, הידרוכלוריד ציסטאין, L-ציסטין וגלוקוז.

חשוב לציין כי אגר שוקולד מועשר יותר אגר דם, אך אינו מאפשר תצפית של דפוסי המוליזה.

שימושים

אגר שוקולד מוכן עם אגר קולומביה

מדיום זה מכיל קזאין ובלב לב מתעכל, פפטיד בשר מתעכל, נתרן כלורי, אגר, תמצית שמרים עמילן תירס. הוא גם עשיר בויטמינים, מינרלים וחומצות אמינו חיוניות.

בסיס זה עם דם מחומם אידיאלי לבידוד של חיידקים של הסוג Neisseria. מצד שני, אם תוספת של ברוסלה מתווסף בינוני, המיקרואורגניזם הנ"ל יכול להיות מבודד. תוצאות משופרת באמצעות דם הסוס.

אגר שוקולד מוכן עם אגר בסיס GC (עבור gonococci)

בינוני זה מכיל peptones, עמילן תירס, monobasic ו dibasic מאגרים, נתרן כלורי ו אגר.

רוב מצגות השוקולד אגר מוכנות מסחריות עם בסיס זה מכיל דם מחומם, אבל תערובת סינטתית של hemin וכן תוספת כימית של גורמי גדילה, ויטמינים, מינרלים, חומצות אמינו, גלוקוז ו- V גורם.

אגר שוקולד מוכן עם אולר Müeller Hinton

הוא משמש לביצוע הבדיקה הרגישות מיקרוביאלית של ביקוש מיקרואורגניזמים, כגון סטרפטוקוקוס דלקת ריאות באמצעות 5% מחומם דם RAM.

הוא משמש גם לבידוד העיקרי של נייסריה והאמופילוס, אך במקרה הבודד של המופילוס השימוש בדם סוס הוא המועדף, שכן הוא מקור עשיר של גורם X ו- V.

מצד שני, אם המדגם להיות נזרע מגיע מאזור לא סטרילי, תוספת של אנטיביוטיקה מומלץ לעכב את הצומח הרגיל של האזור..

דוגמה לדגימות הנשימה שבהן חשודים נוכחות של חיידקים של הסוג המופילוס Bacitracin משמש כדי לעכב את הצמיחה של סטפילוקוקוס, מיקרוסקוקוס, סטרפטוקוקוס ו Sapsrophytic Neisseria.

במקרה של דגימות של איברי המין, שם הוא חשוד המופילוס דוקרי, אגר שוקולד שהוכנו בצורה הבאה שימש בהצלחה: אגר Müeller-Hinton עם 5% דם סוס chocolatized, 1% העשרה Isovitalex ו 3 מיקרוגרם / מ"ל ​​vancomycin.

אגר שוקולד מוכן עם אגר Thay מרטין

מדיום זה מיוחד לבידוד של נייסריה גונוראהי. זה חייב להכיל אנטיביוטיקה כדי לעכב את הצומח הנלווה. דם טלה משמש.

הכנה

יש לראות את האינדיקציות להכנת אגר הבסיס לשימוש. הם על הגב של החבילה של המדיום מיובש. הם בדרך כלל מתארים כמה צריך לשקול כדי להכין ליטר אחד של המדיום תרבות.

במעבדה אתה יכול להכין את הסכום המדויק הדרוש, זה יכול להיות פחות או יותר מ 1 ליטר.

חישובים

כלל של שלושה נעשה כדי לחשב כמה צריך להיות במשקל כדי להכין את עוצמת הקול הרצויה. דוגמה:

אם עבור 1 ליטר יש צורך לשקול 40 גרם המעבדה דורשת 800 מ"ל, הוא אמר:

1000 מ"ל -40 גרם

800 מ"ל - X

הנוסחה תהיה כדלקמן:

X = 32 גרם (כמות לשקול 800 מ"ל).

לשקול ולהמיס

אנחנו ממשיכים לשקול את הכמות הנדרשת ומניחים אותה במים עם פיולה.

מחממים לחום מתון ומערבבים בעדינות עם תנועות סיבוביות עד בינוני מיובש הוא מומס לחלוטין, משאיר אותו לרתיחה במשך 1 דקות.

לעקר

Fiola מוכנס לתוך החיטוי לעקר את המדיום על 121 מעלות צלזיוס במשך 20 דקות.

צבירת דם

כאשר עוזבים את החיטוי הוא נשאר לנוח עד הטמפרטורה של המדיום הוא בין 56 ל 70 מעלות צלזיוס כדי למקם את הדם ומערבבים עד בינוני הופך חום.

אם אתה הולך להוסיף תוספי מזון, זה הזמן לעשות את זה. לאחר מכן לערבב ומגישים 20 מ"ל לכל צלחת פטרי סטרילי.

ההליך כולו חייב להתבצע מכסה המנוע זרימה למינרית או סביב מבער Bunsen.

תן לעמוד עד שהם לחזק ולשמור הפוך במקרר.

דרך נוספת להכין אגר שוקולד ללא שימוש בדם

המדיום הבסיס מוכן כפי שתואר לעיל, ההמוגלובין המיובש מסחרית שהושג הוא מומס ו מעוקרים החיטוי.

שני הפתרונות מותרים להתקרר ל 50 מעלות צלזיוס, להצטרף ולהוסיף את התוספת. מערבבים בתנאים aseptic ולאחר מכן לשרת צלחות פטרי סטרילית.

בקרת איכות

חשוב כי הדם ממוקם בטמפרטורה המצוין, כי זה האידיאלי lyse כדוריות הדם האדומות באותו זמן לשמור על גורם V כי הוא thermosensitive.

לא צריך להיות שום בועות על פני השטח של אגר. כל אצווה של 100 לוחות צריך להיות מודגרות אחת או שתי צלחות בתנור על 37 מעלות צלזיוס במשך 24 שעות כדי לבדוק את העוקץ שלה.

לקבלת התוצאות הטובות ביותר, אגר שוקולד צריך לשמש זמן קצר לאחר ההכנה.

זנים חיידקים בקרה צריך לקחת במעבדה כדי להעריך את היעילות של המדיום מוכן טרי לגידול של המיקרואורגניזמים התובעניים העיקריים של חשיבות קלינית.

הפניות

1. García P, Paredes F, פרננדז דל באריו מ. (1994). מיקרוביולוגיה קלינית מעשית. אוניברסיטת קדיז, מהדורה שנייה. שירות פרסומי UCA.
2. פורבס ב ', סחם ד', וייסנפלד א. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי & סקוט. 12 ed. ארגנטינה Panamericana S.A העריכה.
3. Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Win W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. (מהד 'ה -5). ארגנטינה, עריכה Panamericana S.A..
4. יאנס R, Reyes A, C רודריגז, גוזמן D, היתכנות א לופ של השימוש במדיום תרבות המבוססת על GC-Biocen אגר למיקרוביולוגיה מעבדה. Rev קובנה מד Trop,  2004; 56 (3): 237-238. זמין ב: scielo.sld.
5. תורמים ויקיפדיה. אגר שוקולד. ויקיפדיה, האנציקלופדיה החופשית. 17 בדצמבר 2018, 19:54 UTC. זמין בכתובת: en.wikipedia.org.