הכנת התקשורת תרבות מה זה מורכב, מטרות צעדים

ה הכנת מדיה תרבותית זוהי מתודולוגיה שגרתית המשמש במעבדות לצמיחה של מיקרואורגניזמים הרצוי. התקשורת תרבות הם מוצקים, נוזלי או מוצק למחצה ההכנות כי יש את כל החומרים המזינים הדרושים לפיתוח של האוכלוסייה חיידקים.

באופן כללי, האמצעים לגידול מיקרואורגניזמים עשירים בחלבונים ובחומצות אמינו, ובדרך כלל מכילים מרכיב כלשהו המעדיף את צמיחת האורגניזם שאתם רוצים ללמוד, כגון ויטמינים, דם, סרום, בין היתר..

אין מדיום תרבותי כללי או אוניברסלי, שכן הרכבו משתנה בהתאם לצרכים של המיקרואורגניזם של עניין. חיידקים מסוימים יכולים לפתח בכל מדיום תרבות, אבל לאחרים יש דרישות מיוחדות.

אינדקס

• 1 מה זה מורכב??
  • 1.1 אגר
  • 1.2 נוזלים
  • 1.3 תמציות
  • 1.4 פפטונים
  • 1.5 בולמי זעזועים
• 2 מטרות
• 3 סוגי מדיה
  • 3.1 מבוסס על הרכב
  • 3.2 מבוסס על סוג המיקרואורגניזם
• 4 שלבים
• 5 הפניות

מה זה מורכב??

מיקרואורגניזמים, כגון פטריות וחיידקים, לא ניתן ללמוד בנפרד בגלל גודל זעיר שלהם. לכן, הם חייבים להיות מעובדים באמצעים מלאכותיים המאפשרים גידול משמעותי באוכלוסייה.

לדוגמה, אם אנחנו רוצים ללמוד חיידקים אנחנו צריכים לספק להם את התנאים המתאימים, כך שהם יכולים להתרבות וליצור מושבה (אשר ניתן לצפות בעין בלתי מזוינת).

הכנת התקשורת תרבות משתנה במידה רבה בהתאם לסוג של מיקרואורגניזם כי אחד רוצה לטפח. לפני הכנת אותו, יש צורך לדעת את הצרכים התזונתיים הבסיסיים של גוף העבודה.

הבא, את המרכיבים הנפוצים ביותר המשמשים בתקשורת תרבות יתוארו יש רעיון כללי של ההכנה שלהם:

אגר

הוא משמש יבולים כסוכן gelling והוא הוסיף כאשר מחפשים בינוני מוצק או חצי מוצק. הסגירה הראשונה סוכן המשמש להכנת התקשורת היה ג'לטין, אבל בשנת 1883 אגר הוכנס לעולם של בקטריולוגיה על ידי W. הסה.

אגר Bacteriological יש כמרכיב העיקרי שלה פוליסכריד של ענפים מורכבים המופקים אצות. תרכובת זו משמשת מעבה עבור מזונות נפוצים כגון גלידה וריבות.

זהו מרכיב בעל ערך רב במיקרוביולוגיה מכמה סיבות. בעיקר בגלל מיקרואורגניזמים לא יכול להשפיל אותו, נוזלי בטמפרטורה של 100 מעלות צלזיוס נשאר במצב נוזלי עד להגיע 45 מעלות צלזיוס או פחות.

במקרה שאתה רוצה להכין בינוני מוצק, ריכוז אגר צריך להיות סביב 1.5%, בעוד מוצקים למחצה צריך להיות מוכן מ 0.3 ל 0.5%.

נוזלים

טיפוח האורגניזמים הפתוגניים דורש נוזלים גופניים כדי שיוכלו להתפתח כפי שהיו בסביבה הטבעית שלהם. מסיבה זו, דם שלם או דפיברילטור נוסף. הנוזל מופק מחיה בריאה, לאחר מעוקרים, מתווסף בינוני התרבות.

תמציות

הם מתקבלים מחלקים שונים של בעלי חיים (כגון בשר או כבד) או ירקות (זרעים) ומעובדים כדי לקבל ריכוז מוצק בצורה של להדביק או אבקה. הנפוצים ביותר הם שמרים, מאלט ובשר.

פפטונים

תרכובות אורגניות אלה מתקבלים על ידי הידרוליזה אנזימטית או כימית של רקמות של בעלי חיים או של ירקות. המטרה היא להוסיף תוכן עשיר בחומצות אמינו, שהן היחידות הבסיסיות של חלבונים.

הלם בולמים

המאגרים או מערכות החיץ נמנעים משינויים פתאומיים ב- pH ומסייעים בשמירה על הטווח האופטימאלי שהגוף סובל.

רוב אורגניזמים יכולים להתפתח כראוי ב pH של 7, אם כי כמה חיידקים מעדיפים התקשורת אלקליין. עם זאת, ישנם חיידקים להתנגד וריאציות pH בין הערכים של 6 ו - 9.

ב מינים רגישים ל- pH, הנזק אינו מיוצר על ידי כמות מופרזת של מימן או יונים hydroxyl, אלא על ידי עלייה של חומצות חלשות או בסיסים שיכולים לחדור לתא.

כמו כן, מוסיפים כי pH כדי לפקח על זה ולמנוע חריגות שנגרמו על ידי תסיסה או תהליכים אחרים מתווספים.

מטרות

המטרה העיקרית בעת הכנת המדיום התרבותי היא להוסיף את כל המרכיבים הדרושים כדי לאפשר את הפיתוח המוצלח של האורגניזם שרוצה להיות מבודד. השילוב היעיל ביותר של רכיבים וחומרים מזינים חייב להיות מזוהה כדי להשיג את המדיום הרצוי.

הן הכנה ואחסון של המדיום הם קריטיים כדי להבטיח צמיחה מוצלחת, שכן צעדים אלה תלויים הרכב של הסביבה ואת הזמינות של חומרים מזינים.

יש לקחת בחשבון שהטיפוח של מיקרואורגניזמים הוא משימה המושפעת ממספר גורמים חיצוניים למדיום התרבות, כגון עוצמת האור המתקבלת, הטמפרטורה ורמת החומציות או אלקליות של המדיום. לכן, כל אחד מהמשתנים הללו חייב להילקח בחשבון.

סוגי מדיה

מבוסס על הרכב

על בסיס ההרכב שלה ישנם שלושה סוגים עיקריים של גידולים: טבעיים או אמפיריים, חצי סינתטיים ומוגדרים סינתטיים או אמצעים כימיים.

סביבה טבעית

בסביבות טבעיות ההרכב המדויק אינו ידוע. אלה כוללים מרכיבים כגון חלב, דם מדולל, מיצי ירקות, תמציות ועירויים של בשר ופפטונים. מסיבות כלכליות, רכיבים בעלות נמוכה מתווספים לעתים קרובות כגון תמצית סויה, מי גבינה, מלסה וכו '..

מדיה חצי סינתטית

זה נקרא בינוני חצי סינתטי אם ההרכב של זה ידוע חלקית. כל מדיום המכיל אגר הופך בינוני סינתטי למחצה.

ביניהם יש לנו אגר papa dextrose, אגר czapek-dox, אגר שיבולת שועל, אגר בשר Peptone, בין דוגמאות אחרות.

מדיום מוגדר סינתטי או כימי

במקרה זה הרכב המדיום - במונחים של כמות של פחמן, חנקן, גופרית, זרחן וכל גורם גורם צמיחה אחרים - ידוע לחלוטין. זה מאוד שימושי אם אתה רוצה להשיג תוצאות לשחזור עבור חוקרים אחרים.

עבור מה שנקרא "מיקרואורגניזמים עם דרישות צמיחה מיוחדת" יש צורך להוסיף את המרכיבים הדרושים. דוגמה מסוג זה הם לקטובצילוס.

מבוסס על סוג של מיקרואורגניזם

כמו כן, קיים סיווג נוסף לתקשורת תרבותית המבוססת על סוג המיקרואורגניזם שיכול לגדול בו. בעקבות עיקרון זה יש לנו את אמצעי ההעשרה הכלליים הבאים, סלקטיביים ודיפרנציאליים. כל אחד מהם מתואר להלן:

פירושו הכללי

אלה מודים את הפיתוח של מגוון רחב של מיקרואורגניזמים. אם אורגניזם כלשהו זקוק לתנאים מיוחדים לצמיחתו, הוא לא יוכל להתפתח בהצלחה בסוג זה של היבול.

אמצעי העשרה

אמצעי העשרה תומכים בצמיחתו של סוג מסוים של מיקרואורגניזם, אך לא נוספה שום חומר למניעת גידול של מיני חיידקים אחרים..

מדיה סלקטיבית

הם מחפשים את הצמיחה הספציפית של מיקרואורגניזם, קוראים לזה פטריות, חיידקים, פרוטוזואה, בין היתר. כדי לעשות זאת, הם מעכבים את התפתחותם של אחרים.

כדי להשיג מטרה זו ניתן להוסיף תרכובות כימיות קטלניות עבור קבוצה גדולה של מיקרואורגניזמים ו מזיק האורגניזם של עניין או הוספת מקורות אנרגיה, כי רק יכול להיות מתבוללים על ידי חיידקים מבוקש.

מדיה סלקטיבית משמשים בעת לקיחת דגימות רפואיות על מנת לגדל מיקרואורגניזם פתוגני. כאן יש צורך להעדיף את הצמיחה של הפתוגן ו לדכא את התפתחות הצומח מיקרוביאלי רגיל מהחולה.

אגר סולפיט ביסמוט, למשל, אינו מאפשר את הצמיחה של חיידקים חיוביים גרם ומספר גדול של חיידקים שנמצאו בחלל הקיבה והמעיים. לכן, הוא משמש לטפח את החיידקים גרם שלילי הגורמות קדחת הטיפוס, סלמונלה טיפי בדגימות צואה.

מדיה דיפרנציאלית

סוג זה משתמש בתכונה דיאגנוסטית כלשהי של האורגניזם המעניין (למשל, בחילוף החומרים שלו, למשל) כדי לזהות אותם כנגד מינים אחרים שצומחים באותה סביבה.

הן המדיה הדיפרנציאלית והן אמצעי התקשורת הסלקטיביים שימושיים מאוד בתחום המיקרוביולוגיה הקלינית ובריאות הציבור, שכן דיסציפלינות אלו צריכות לזהות את נוכחותם של מיקרואורגניזמים ספציפיים הקשורים לתנאי היגיינה ירודים או לתנאים..

חומרים אינדיקטורים ניתן להוסיף את היבול שנותנים מאפיין ייחודי למושבה הרצוי. לדוגמה, אגר- eosin-methylene כחול (מקוצר EMB) ו MacConkey- אגר מתווספים עם לקטוז מחוון pH.

לכן, כאשר המושבה מפותחת בתקשורת אלה עם היכולת התסיסה לקטוז לייצר aldehydes, הם יכולים להיות נצפתה בצבע מיוחד.

צעדים

כיום התקשורת תרבות ניתן לרכוש בצורת lyophilized. לכן, ההכנה מקלה ורק את המוצר מיובש. יש לשקול את התכנים (בהתחשב בכמות הסופית שאתה רוצה להכין) והתמוסס במים מזוקקים בעקבות כל הסימנים של המוצר.

התוכן של התקשורת נוזלי יש לחלק את המכולות הרצוי (צלחות פטרי, צינורות וכו ') עבור עיקור הבא. כדי להפיץ את המדיום מוצק יש צורך להמיס אותו באמצעות מיקרוגל או על ידי הנושא את החומר לאמבט מים. ה- pH של המדיום חייב להיות מותאם.

בדרך כלל אגר משמש מבחנות או בצלחת פטרי. אם אגר מתקשה במצב נוטה, עם הזווית המתאימה כך קצה המסוף הסופי באלכסון, הסדר זה נקרא פסגה חליל או צינורות נוטה. כאשר אגר מתקשה במצב אנכי מלא זה נקרא "עמוק".

לאחר סטריליזציה של התקשורת - באמצעות החיטוי - מותר להם להתקרר. אלה חייבים להיות מטופלים בסביבה ללא מיקרואורגניזמים, הנפוץ ביותר הוא לעבוד עם מצית מואר המבטיח סביבה aseptic בסביבתה.

הפניות

1. Celis, J. E. (2006). ביולוגיה של תאים: מדריך מעבדה (כרך ב). אלסבייר.
2. פיינגולד, ש.מ., ביילי, W.R., Baron, E.J., Fineglod, S.M., & Scott, E.G. (1991). ביילי סקוט: אבחון מיקרוביולוגי. פאן אמריקן מדיקל.
3. Olivas, E. (2004). מדריך לתרגולי מיקרוביולוגיה I ו- II וטפילים. האוניברסיטה האוטונומית של סיודאד חוארז.
4. Schlegel, H. G, & Zaborosch, C. (1993). מיקרוביולוגיה כללית. הוצאת אוניברסיטת קיימברידג '.
5. Tortora, G. J., Funke, B. R., & Case, C. L. (2007). מבוא למיקרוביולוגיה. אד פנמריקנה מדיקל.